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新生牛血清是通過對出生12-24小時新生牛進行靜脈采血而得到的血清。新生牛血清中營養豐富,蛋白含量和各種生長因子都較高,價格較胎牛血清低得多,是目前動物細胞培養中極為常用的血清。
一、新生牛血清特點:
1、來自通過心臟穿刺新生牛無菌收集的凝結的血液,是高鐵和高鐵傳遞蛋白水平的新生牛血清。
2、每個批次都經過嚴格的控制和測試,新生牛血清批次間的差異小,質量均一。
3、新生牛血清是無菌過濾的,并且pH值是中性的,適合于細胞的生長。
4、廠家對新生牛血清進行內毒素檢查,超過細胞培養試驗標準。介質不大于0.625歐/毫升,不含病毒制劑。
5、新生牛血清是由各種大小的生物分子和不同激素濃度組成的復雜混合物,營養豐富。
二、新生牛血清保存方法:
1、長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。
2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾**。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。
3、血清解凍: 瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
三、解凍血清注意事項:
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。
1.解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
2.解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生
3.請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
5.若必須做血清的熱滅活,新生牛血清請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
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