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穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建

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穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選

詳細(xì)介紹

穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建

構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選。穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建周期長、難度大，每一步都很關(guān)鍵，尤其是細(xì)胞轉(zhuǎn)染，常用物理方法(電轉(zhuǎn))、化學(xué)方法(脂質(zhì)體等)、生物方法(病毒)，根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)條件，選擇方法，來達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>

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構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系

菲優(yōu)特檢測(cè)生物團(tuán)隊(duì)提供哺乳動(dòng)物穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù)，與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同，穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞并整合到細(xì)胞的染色體上，使宿主細(xì)胞可長期表達(dá)目的基因，穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)的蛋白/抗體穩(wěn)定性更好和批次差異性更小。

構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的真核表達(dá)載體的抗性篩選標(biāo)志物有(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin)，常用G418來代替進(jìn)行選擇性篩選，得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白，或者穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株。

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