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上海通蔚生物有限公司

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技術(shù)文章

閱讀：345發(fā)布時(shí)間：2020-11-3

細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)技術(shù)elisa試劑盒

細(xì)胞的復(fù)蘇
【概述】

復(fù)蘇細(xì)胞要求快速融化的手段，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化。避免
由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損害。elisa試劑盒
【用品】

培養(yǎng)液、吸管、離心管、培養(yǎng)瓶
【步驟】

[1] 打開(kāi)水浴鍋，將溫度調(diào)至 37 ℃；

[2] 從液氮中取出凍存的細(xì)胞株，用鑷子夾住凍存管（戴防護(hù)面罩），迅速置入 37 ℃的
水浴鍋中，不斷振搖凍存管，使之盡快融化，要在 1-2 min 內(nèi)完成復(fù)溫；

[3] *融化后，取出凍存管，移至超凈工作臺(tái)，用 75%酒精擦洗消毒，用無(wú)菌吸管吸取
細(xì)胞懸液移至無(wú)菌離心管，加 10 倍的含 10%胎牛血清的培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹勻；

[4] 細(xì)胞懸液離心，1000rpm，5-8min，小心棄上清液。加入適量含 10%胎牛血清的培養(yǎng)
液，接種于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃、5% CO2、飽和濕度孵箱中培養(yǎng)；elisa試劑盒

[5] 次日更換培養(yǎng)基，以后按常規(guī)培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)。如果復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞密度較高及時(shí)傳代。
細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞密度以 5×105 個(gè)/ml。



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