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上海通蔚生物有限公司
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閱讀:528發布時間:2020-10-12
影響細胞轉染的因素,你知道嗎?
血清:血清影響復合物的形成,降低轉染效率
陽離子脂質體和 DNA 的量在使用血清時會有所不同,因此想在轉染培養基中加入血清時要進行條件優化。大部分細胞可以在無血清培養基中幾個小時內保持健康,對于對血清缺乏比較敏感的細胞,可以使用 OPTI-MEM I 培養基。對于對血清缺乏比較敏感的貼壁細胞,建議使用 LIPOFECTAMINE 2000。
抗生素:
比如*和*,是影響轉染的培養基添加物。這些抗生素一般對于真核細胞無毒,但陽離子脂質體試劑增加了細胞的通透性,使抗生素可以進入細胞。這降低了細胞的活性,導致轉染效率低。
細胞代數:
轉染前細胞經過 1-2 次傳代保證細胞生長旺盛容易轉染,注意貼壁細胞一旦長滿就不好轉染。
細胞鋪板密度:
一般轉染時,貼壁細胞密度為 70%-90%,懸浮細胞密度為 2*10^6--4*10^6 細胞/ml 時效果較好。確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。鋪板細胞數目的增加可以增加轉染活性和細胞產量。
DNA質量:
DNA 質量對轉染效率影響非常大。一般的轉染技術基于電荷吸引原理,如果 DNA 不純,如帶少量的鹽離子,蛋白,代謝物污染都會顯著影響轉染復合物的有效形成和轉染的進行。
酶聯免疫試劑盒(ELISA試劑盒):內分泌系列、肝纖維化系列、傳染病系列、優生優育系列、腫瘤系列、細胞因子系列、自身免疫系列等系列酶聯免疫試劑盒生化試劑:氨基酸類、蛋白質類、抗生素類、酶類、植物激素及核酸類、碳水化合物類、色素類、維生素類、分離材料及耗材類、表面活性劑類、緩沖劑類、其它試劑類、培養基類等試劑類產品標準品:中藥化學標準品、西藥標準品、抗生素標準品、生化標準品等類別標準品公司不斷開發新產品,誠信服務,以質量及信用為本,與眾多顧客加強合作,建立良好關系。我們長期深受廣大客戶的支持與厚愛,我們用專業的眼光,的質量,服務于國內外廣大客戶。
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