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上海通蔚生物有限公司
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閱讀:398發布時間:2019-5-13
ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗確診方法。雖然ELISA試劑盒的操作進程看似簡略,但沒做到位的話就會影響實驗的作用。
所以ELISA試劑盒實驗時至關重要的進程有:
一,、重要的洗刷:
不充分的洗刷會導致差異和高布景,然后帶來不抱負的實驗效果。假設未結合的資料殘留在微孔板中,那么它會增加布景噪音。有必要的話,可增加洗刷液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。假設布景過高,置疑洗刷不夠時,能夠檢驗增加洗刷次數。
第二、要害的關閉:
關閉液的作用是讓不相關的蛋白占有微孔板中潛在的結合位點。這就下降了可發生信號的抗體非特異結合的時機。假設布景過高,置疑關閉不充分,那么能夠檢驗運用更高濃度的關閉液,或恰當延伸關閉時刻。
現在主要有兩種類型的關閉液:蛋白和非離子型去污劑。運用的類型須取決于多個要素,包含微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關閉液應下降非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發生相互作用。
第三、抗體濃度須優化:
假設試劑稍有不同,則或許需要優化抗體的量。非特異的抗體結合會增加布景。為了防止這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。
第四、檢測試劑要適量:
切勿運用過多的檢測試劑。假設濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高布景。也不要顯色過度,如有必要,優化一下何時應參與停止液。
只要保證每一步操作都做到位,才會呈現的實驗效果。所以ELISA實驗的每一步都很重要,不能夠漫不經心。
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