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上海邦景實業有限公司
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更新時間:2022-05-19 11:05:05瀏覽次數:323
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商品屬性:
產品名稱:人臍帶間充質干細胞
貨號:BJ-X97752
規格:1×10?Cells/T25培養瓶
分類:免疫細胞及干細胞
商品介紹:
名稱 人臍帶間充質干細胞 3.產品規格:1×106cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 臍帶間充質干細胞是一種能分化成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞的多能干細胞。其具有大的增殖能力,且參與構成造血微環境,因此被廣泛應用于組織工程,細胞治療和基因治療。 Procell人臍帶間質干細胞取自健康足月分娩孕婦的臍帶,其擁有大的自我更新能力并具有多向分化潛能。 臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化,臍動脈和臍靜脈就發達起來,在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走,某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復等方面發揮積極作用。間充質干細胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下,可分化為多種造血細胞以外的組織細胞,并具有造血支持、免疫調節、組織修復等作用;目前,多用于風濕免疫疾病的治療。間充質干細胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子,促進造血干細胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調節、抗炎和組織修復作用,可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關并發癥。 質量控制: 本產品經過了細菌、真菌、霉菌、支原體檢測。 產品承諾: 人臍帶間質干細胞的體外培養周期有限;建議使用Procell配套的培養基和正確的培養方法來培養、傳代,以此保證細胞具備良好的增殖和分化能力。 產品用途: 本產品只提供給進一步的科研使用,不可應用于治療等其他方面。 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
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