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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2023-01-06 09:35:09瀏覽次數：266
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操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
商品屬性：
產品名稱：人臍靜脈細胞融合細胞：EA.hy926
貨號：BJ-X96590
規格：1×10?cells/T25培養瓶
分類：細胞系
商品介紹：
名稱 EA.hy926 (人臍靜脈細胞融合細胞) 種屬 人類 年齡（性別） 不詳 組織來源 臍靜脈/體細胞雜交 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 上皮細胞樣 背景描述 EA.hy926細胞是在PEG脅迫下，將原代培養的人臍靜脈細胞與抗硫的A549克隆株融合，構建的一株人臍靜脈細胞株。融合子在HAT培養基上生長，并以Ⅷ因子相關抗原篩選，EA.hy926細胞已經過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示，Weibel-Palade小體的細胞質分布以及組織特異性的細胞器，分化的內皮細胞特性如血管生成，體內平衡-血栓形成，血壓及炎癥反應。 生物安全等級 1 生長培養基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~12-24小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 抗原表達情況 Factor VIII-related antigen; Homo sapiens, expressed 基因表達情況 Factor VIII-related antigen; Homo sapiens. 保藏機構 ATCC; CRL-2922 |
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：產品僅用于科研
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
L型電壓依賴型鈣通道β4抗體
電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體
鈣結合蛋白1抗體
神經型合成酶結合蛋白抗體
毒蕈堿型乙酰受體M4抗體
FITC標記的脂肪特定轉錄因子2抗體
FITC標記的錨蛋白重復及SAM結構域蛋白1A抗體
FITC標記的錨蛋白重復結構域蛋白9抗體
FITC標記的錨蛋白重復結構域蛋白13A抗體
FITC標記的錨蛋白重復結構域蛋白12抗體
人臍靜脈細胞融合細胞：EA.hy926大鼠補體因子D(adipsin)(CFD)elisa分析檢測試劑盒
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