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上海邦景實業有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-12-10 09:24:14瀏覽次數：164
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cDNA 第一鏈合成試劑盒10 次 非變性蛋白分子量標準25mg
cDNA 第一鏈合成試劑盒50 次 二氯異溶液，10mg/mL5mL
AMV cDNA 第一鏈合成試劑盒30 次 B 硫酸鹽5mL
miRNA cDNA 第一鏈合成試劑盒25 次 動植物總蛋白微量提取試劑盒50 次
miRNA 熒光定量檢測試劑盒25 次 動植物膜蛋白微量制備試劑盒50 次
商品屬性：
產品名稱：小鼠前列腺癌細胞：RM-1
貨號：BJ-X96517
規格：1×10?cells/T25培養瓶
分類：細胞系
商品介紹：
名稱 RM-1 (小鼠前列腺癌細胞) 年齡（性別） 男；54歲 組織來源 器官：前列腺； 疾病：正常； 細胞類型：上皮細胞 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 上皮細胞樣 背景描述 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進行轉化，建立了RWPE-1細胞株[PubMed:9214605]。在三維Matrigel培養時，在雄激素作用下，RWPE-1細胞形成腺胞并向培養基中分泌PSA[PubMed:11170142]。當與Matrigel或基質細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-1細胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并產生PSA。來源于RWPE-1細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2細胞株[PubMed:9214605]和RWPE2-W99細胞株。另外，用N-甲醇-N-(MNU)處理RWPE-1細胞，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。它們是WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26細胞株。據提供者報道，RWPE-1細胞經過檢測，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。 生物安全等級 2 生長培養基 K-SFM＋0.05mg/mL BPE＋5ng/mL EGF＋1% P/S 推薦傳代比例 1:2-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~22 hours 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性 No, in nude mice (with or without Matrigel). No, in soft agar. 受體表達情況 androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen) 抗原表達情況 kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen); (upon exposure to androgen) 基因表達情況 cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+ 保藏機構 ATCC; CRL-11609 |
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：產品僅用于科研
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
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