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單克隆抗體的制備及應用范圍

2024-1-29  閱讀(79)

單克隆抗體是僅與目標蛋白某一特定表位結合的單一抗體。

單克隆抗體的制備:

簡單來說就是將免疫原注射到宿主動物體內產生免疫反應,之后把 B 細胞從脾臟中移出,單種 B 細胞與骨髓瘤細胞融合為 B 細胞雜交瘤,成為一個永生化胞株。這樣一來,雜交瘤的 B 細胞就會一直產出只識別單一表位的單克隆抗體,通常這個胞株會有一個特定的克隆號(clone number),用來與其他胞株區分。雜交瘤接下來可以被注射到小鼠的腹腔中大量生產,雜交瘤分泌富含抗體的一種液體,被稱作腹水,用注射器抽取純化,就可獲得大量的單克隆抗體。

單克隆抗體更適用于:
1、檢測單一抗原
2、檢測蛋白質家族的單一成員
3、不同實驗/批次的抗體檢測結果穩定一致
4、細胞染色背景較低-很適用于 IHC、ICC、IF 等應用
5、量化蛋白質表達 (例:流式或熒光細胞分選)
6、探測分子結構變化
7、探測磷酸化狀態的變化
8、為 X 射線晶體測試探測目標
9、制作缺少特定細胞類型的動物模型
10、免疫治療

單克隆抗體不建議用于:
1、根據同源性檢測不同物種的目標蛋白;
2、檢測濃度較低的目標蛋白;
3、檢測形態變化了的蛋白。



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