雞IgY ELISA KiT 雞IgY酶聯(lián)免疫試劑盒
【工作原理】
IgY,由兩條重鏈(H)和輕鏈(L)組成,重鏈(υ)由一個可變區(qū)(V)和4個恒定區(qū)(C)組成,沒有鉸鏈結(jié)構(gòu)。完整分子量為180KDa(7.8S),重鏈為 67-70KDa,輕鏈為25KDa,但還存在一個小體積副本,120KDa(5.7S),發(fā)現(xiàn)于野鴨和某些龜類中。克隆IgY H鏈表明,較小的IgY H鏈缺乏C3、C4區(qū),由于使用了特異的末端外顯子(位于C2和C3恒定區(qū)外顯子間的內(nèi)含子中),5.7S的IgY的H鏈僅有兩個C區(qū),實際與7.8S IgY的H鏈CH1和CH2相*。5.7S IgY與F(ab`)2片段十分相似,因此正確名稱為IgY(△Fc),其H鏈為υ(△Fc)。7.8S IgY和5.7S IgY(△Fc)可共存于同一種動物或單獨存在:鴨和鵝都有全長和截短的IgY,雞和火雞僅有全體積的IgY分子。比較IgG和IgY的恒定區(qū)發(fā)現(xiàn),IgG的Cγ2、Cγ3與IgY的Cυ3、Cυ4極相似,而Cυ2可能經(jīng)“壓縮”形成IgG的鉸鏈結(jié)構(gòu),鉸鏈結(jié)構(gòu)是哺乳動物抗體的*結(jié)構(gòu)。在IgY分子結(jié)構(gòu)上的Cυ1-Cυ2和Cυ2-Cυ3間存在*、*殘基,這些區(qū)域為IgY分子提供了一定的擺動性。所提供的ELISA Kit是典型的競爭法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為抗雞IgY抗體,檢測相為HRP標記雞IgY。樣品和HRP標記雞IgY同時加入酶標板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測蛋白呈反相關(guān)。
雞IgY ELISA KiT 雞IgY酶聯(lián)免疫試劑盒
【每套試劑盒中內(nèi)容】 材料 數(shù)量
雞IgY標準品 96T(2支)
預(yù)包被雞IgY抗體的96孔板 96T(8×12)
HRP標記雞IgY 96T×1(1:100)
雞IgY樣品稀釋液 96T×1
雞IgY抗體稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
說明書 1份
【需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標準規(guī)格酶標儀。
3. 自動洗板機。
4. 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。