小鼠血小板生成素（TPO）酶聯(lián)免疫試劑盒
【工作原理】
血小板生成素（Thromboietin TPO）又名巨核細(xì)胞生長因子（Megakaryocyte Growth and Development MGDF）由332氨基酸組成的糖蛋白。TPO產(chǎn)生部位主要為腎臟（亦有證據(jù)表明TPO產(chǎn)生部位主要為肝臟）。TPO是一種激素調(diào)節(jié)因子，它的分泌受外周血小板數(shù)量的影響，與血小板計數(shù)呈負(fù)相關(guān)。其生物學(xué)作用：（1）生理調(diào)節(jié)造血祖細(xì)胞演化成成熟巨核細(xì)胞增殖和分化；（2）與EPO一起相互協(xié)調(diào)，共同刺激原核細(xì)胞和紅細(xì)胞的生成；共同促進(jìn)骨髓抑制療法后血小板和紅細(xì)胞的恢復(fù)；（3）TPO作為Mpl受體的配體，可防止血小板減少而不增加血栓閉塞并發(fā)癥的危險。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)*（biotin）標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
【注意事項】
1. 從-20℃取出的試劑盒，在4℃解凍過夜。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻，避免解凍時出現(xiàn)的分層，否則會出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。
2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
3. 配制各種試劑時，切記混勻！
4. 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
5. 建議所有小鼠TPO標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測。
6. 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活！
7. 為免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。
小鼠血小板生成素（TPO）酶聯(lián)免疫試劑盒【洗板方法】
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將*的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板：如果有自動洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
【樣品的準(zhǔn)備和保存】
樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存，且避免反復(fù)凍融。
血清——用干凈試管收集血液，室溫凝固2小時或4℃過夜，離心1000×g 10分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
環(huán)保在線