人血管內(nèi)皮細胞生長因子A(VEGF-A)酶聯(lián)免疫試劑盒【工作原理】
VEGF-A,血管內(nèi)皮細胞生長因子A。VEGF家族包括 6種亞型:VEGF - A、VEGF - B、VEGF - C、(VEGF - D、VEGF - E以及胎盤生長因子 placental growth factor,)PGF ,序列呈高度同源性。VEGF - A發(fā)現(xiàn)zui早 ,故多數(shù)文獻中的 VEGF即指 VEGF - A。1989年由 Ferrara等人從牛垂體的濾泡星狀細胞中提取。人體多種組織細胞中均有不同程度表達。人類 VEGF - A基因定位于 6號染色體的短臂1區(qū) 2帶 6p21 ,全長 28 kb,其中編碼基因長約 14 kb,由 8個外顯子和 7個內(nèi)含子組成 ,經(jīng)剪接后形成 6種單體 ,根據(jù)氨基酸數(shù)目命名為 VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF189 、VEGF206以及 VEGF115。外顯子 1~5編碼被 VEGF - A受體識別的結(jié)構(gòu)域。外顯子 6和 7編碼肽段的存在與否是 VEGF - A各單體的主要區(qū)別。各單體功能上的差異主要是它們與細胞表面和細胞外基質(zhì)中肝素的親和力不同。提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
人血管內(nèi)皮細胞生長因子A(VEGF-A)酶聯(lián)免疫試劑盒【每套試劑盒中內(nèi)容】(96T)
材料 數(shù)量
人VEGF-A標準品 96T(2vial)
預(yù)包被人VEGF-A抗體的96孔板 96T(8×12)
*標記人VEGF-A抗體 96T (1:100)
ABC(親和素-過氧化物酶復(fù)合物) 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
人VEGF-A抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA洗滌液 96T×1(1:25)
【需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標準規(guī)格酶標儀。
3. 自動洗板機。
4. 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。