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上海莼試生物技術有限公司
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上海市
更新時間：2024-10-10 09:34:38瀏覽次數：57
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原代細胞VS細胞系：
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。
商品屬性：
組織來源 | 腦膜組織 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
產品貨號 | CS-X3373 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介：
小鼠腦膜分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內為硬腦膜、蛛網膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦，參與中樞神經系統的正常發育，能穩定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腦膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠腦膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點，也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
公司正在銷售的產品：
小鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 大鼠結締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒
Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit 人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
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直接細胞克隆兩步法逆轉錄PCR試劑盒100次
Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISAKit小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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小鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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Mouse phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
MouseLeptin,LEPELISAkit 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanfibromodulin,FMODELISAKit人纖調蛋白規格：48T/96
細胞/組織高質化高爾基體分離試劑盒10次
ELISAKitMMP-5大鼠基質金屬蛋白酶5規格：48T/96
SERPINA6重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 標簽) Protein
ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉換酶(抗原)
FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標簽) Protein
DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標簽)
LAMP1 Protein Rat 重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠腦膜成纖維細胞ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉換酶(抗原)
DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標簽)
SERPINA6重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 標簽) Protein
LAMP1 Protein Rat 重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標簽)
FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標簽) Protein
原代細胞培養的具體步驟：
1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。
3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。
7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。
8、培養：置于37℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。
