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上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-01 09:26:22瀏覽次數:353
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細胞名稱 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性河川型水牛與沼澤型水牛雜交后代的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經平衡后離心8分鐘,速度為1000轉/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Japanese white-eye/Hong Kong/1038/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H10N3 甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/WSN/33) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H1N3 甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
HA cDNA H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)
GB cDNA Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB 基因全長ORF克隆
其他基因
WDR12 cDNA Rat 大鼠 WDR12 基因全長ORF克隆
FAM118B cDNA Rat 大鼠 FAM118B 基因全長ORF克隆
STARD3NL cDNA Rat 大鼠 STARD3NL 基因全長ORF克隆
TYW1 cDNA Rat 大鼠 TYW1 基因全長ORF克隆
EPS8L2 cDNA Rat 大鼠 EPS8L2 基因全長ORF克隆
CLDN18 cDNA Rat 大鼠 CLDN18 基因全長ORF克隆
CROT cDNA Rat 大鼠 CROT 基因全長ORF克隆
PDIA4 cDNA Rat 大鼠 PDIA4 基因全長ORF克隆
RRM1 cDNA Rat 大鼠 RRM1 基因全長ORF克隆
RBM5 cDNA Rat 大鼠 RBM5 基因全長ORF克隆