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技術文章

豬睪酮(T)elisa*

閱讀:95發布時間:2017-12-3

豬睪酮(T)elisa*北京方程生物免費代測:

 【樣品收集】

樣品如果不立即分析,應分裝后冷凍保存,且避免反復凍融。

血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時或4℃過夜,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細胞培養、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

 

豬睪酮(T)elisa* Perfectstart Taq master Mix (2X)是即用型的PCR反應預混液,體系中包含熱啟動的Perfectstart Taq DNA聚合酶,反應緩沖液,dNTP,PCR穩定劑和增強劑,進行PCR反應時只需在mix中加入引物,模板和滅菌水即可,本產品能夠大大簡化 PCR操作,減少交叉污染,降低操作錯誤的風險,特別是使用熱啟動的聚合酶后擴增效率增高,擴增特異性增強,整個PCR 體系配置過程都可以在室溫下完成,得到的PCR產物在3‘端有一個dA的尾巴,因此可用于TA克隆。本產品需要保存于-20°C,如經常使用可置于4°C。

豬睪酮(T)elisa* 保溫在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時,產物的生成可達。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內,標準室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA板只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。

豬S100鈣結合蛋白B(S100B)elisa測定

膜聯蛋白A3(ANXA3)

抗增殖細胞核抗原(PCNA)

人肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)檢測ELISA Kit

人*蛋白酶23(PRSS23)檢測ELISA Kit

Ⅲ型膠原(COL3)

人膜聯蛋白A1(ANXA1)檢測ELISA Kit

人間隙連接蛋白β1(GJβ1)檢測ELISA Kit

植物*(AMS)elisa測定

 


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