背景介紹：This gene encodes one of the major intermediate filament proteins of mature astrocytes. It is used as a marker to distinguish astrocytes from other glial cells during development. Mutations in this gene cause Alexander disease, a rare disorder of astrocytes in the central nervous system. Alternative splicing results in multiple transcript variants encoding distinct isoforms.

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膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體,Anti-GFAP抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質(zhì)*產(chǎn)品。我公司銷售國內(nèi)外科研產(chǎn)品，如生物試劑、生化試劑，一抗二抗，各種標(biāo)記抗體，Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒，放免試劑盒，培養(yǎng)基，各種動(dòng)物血清等產(chǎn)品，歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。

中文名稱：膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體

英文名稱：Anti-GFAP antibody

規(guī)格：0.1ml/0.2m

濃度：1mg/1ml

抗體來源：本公司抗體有兔來源和鼠來源等

克隆類型：兔來源為多抗，鼠來源為單抗

產(chǎn)品類型：一抗

膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體,Anti-GFAP抗體簡單介紹：

別 名：Astrocyte; FLJ45472; GFAP; Glial Fibrillary Acidic Protein; Intermediate filament protein; GFAP_HUMAN

此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售，相關(guān)標(biāo)記有：Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記

各種HRP酶標(biāo)記成抗體的效價(jià)測(cè)定程序如下（如：羊抗鼠IgG-HRP的效價(jià)測(cè)定）：

1、抗原包板：15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔；

2、37°C包被60min或4°C過夜；

3、PBST洗板3次，5min/次；

4、加入倍比稀釋的HRP標(biāo)記抗體 0.1ml/孔；

5、37°C 30min；

6、PBST洗板5min/次×3；

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min；

8、終止液：2N H2SO4 0.05ml/孔；

9、450nm 測(cè)定OD值；

陽性O(shè)D值比對(duì)照值大3倍，為判斷效價(jià)稀釋度。

免疫印跡法是一種通過凝膠電泳分離蛋白質(zhì)并通過電轉(zhuǎn)移把蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到吸附膜上。一經(jīng)蛋白印跡后，即可通過特異性的標(biāo)記抗體檢測(cè)到相應(yīng)蛋白質(zhì)。

    十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）可用于檢測(cè)已被SDS化學(xué)變性的蛋白。然而，某些特定的抗體不會(huì)在一個(gè)變性的蛋白質(zhì)分子上識(shí)別其抗原表位，這時(shí)需要進(jìn)行不含SDS的聚丙烯酰胺凝膠電泳。

    蛋白印跡轉(zhuǎn)膜可以通過濕法或半干法進(jìn)行。在前者，凝膠夾在印跡膜和各種過濾裝置中間，然后把整個(gè)裝置埋進(jìn)一個(gè)裝滿Tris轉(zhuǎn)移緩沖的電極槽中。在后者，夾在中間的凝膠周圍只有少量的緩沖液，然后封閉在電極板之間。雖然半干法轉(zhuǎn)膜較快，但需要很好地?cái)M合各部分的夾層配件，而濕法轉(zhuǎn)膜很少會(huì)出現(xiàn)問題，可以盡量保持重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的*性。此外，如果半干法轉(zhuǎn)膜時(shí)間過長，較小分子量的蛋白質(zhì)可能會(huì)從膜上轉(zhuǎn)過。

    轉(zhuǎn)膜后，需對(duì)膜進(jìn)行封閉，以減少非特異性蛋白結(jié)合，然后進(jìn)行用一抗孵育膜，以研究感興趣的目標(biāo)蛋白。單克隆抗體通常具有更高的特異性；然而許多單克隆抗體產(chǎn)生于某個(gè)特定肽段而不是一個(gè)天然蛋白質(zhì)，因此可能無法檢測(cè)到PAGE所分離的天然蛋白。也可使用多克隆抗體，但易形成較高的背景值。因一抗通常無標(biāo)記，所以需要一個(gè)可以結(jié)合在一抗Fc段的標(biāo)記的二抗，以用于zui后的檢測(cè)。通常會(huì)用酶來標(biāo)記二抗。酶標(biāo)記后的印跡可通過化學(xué)發(fā)光酶底物及放射自顯影技術(shù)成像。被抗體檢測(cè)和標(biāo)記到的蛋白質(zhì)會(huì)出現(xiàn)在圖像的暗區(qū)。

斑點(diǎn)印跡法類似于免疫印跡法，在膜上檢測(cè)目標(biāo)蛋白；但是斑點(diǎn)印跡法中檢測(cè)的蛋白質(zhì)不用電泳進(jìn)行分離。取而代之的是，含有目標(biāo)蛋白的樣品被直接“點(diǎn)”到膜上，這不能做到定量檢測(cè)，但它可以直接檢測(cè)某種特定蛋白的有無。例如，斑點(diǎn)印跡法可用于檢測(cè)蔗糖梯度分離的細(xì)胞裂解產(chǎn)物中的某些蛋白質(zhì)定位。

膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。

免疫印跡試驗(yàn)常見的問題及原因

微弱的條帶（weak single）

可能存在的原因：蛋白與抗體結(jié)合率低  

解決方法:較少洗膜次數(shù)或者縮短洗膜時(shí)間；

降低洗膜液中NaCl的濃度（0.15M-0.5M）；

降低抗體稀釋液中NaCl的濃度（0.15M-0.5M）

可能存在的原因：抗體量不足 

解決方法:抗體和蛋白的結(jié)合較低，可將抗體濃度調(diào)整至初始濃度的2-4倍

可能存在的原因：蛋白量不足 

解決方法:增加蛋白上樣量

可能存在的原因：酶和底物時(shí)效   

解決方法:將酶和底物進(jìn)行反應(yīng)，觀察現(xiàn)象，出現(xiàn)異常，則需要重新標(biāo)記或者購買

可能存在的原因：過期或者陳舊的ECL發(fā)光液 

解決方法:更換的新的ECL發(fā)光液

可能存在的原因：脫脂奶粉可能會(huì)掩蓋一些抗原   

解決方法:降低牛奶的百分比或者用BSA代替

相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

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Anti-ABCA5抗體,三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A亞基5抗體
Anti-ABCF3抗體,三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體