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心臟蛋白磷酸酶1結合蛋白抗體,Anti-RNF158抗體簡單介紹：

【中文名稱】：心臟蛋白磷酸酶1結合蛋白/環指蛋白158抗體

【英文名稱】：Anti-RNF158抗體

【別  名】：Heart protein phosphatase 1-binding protein; HEPP1; Putative E3 ubiquitin protein ligase SH3RF2; Putative E3 ubiquitin-protein ligase SH3RF2; RING finger protein 158; SH3 domain containing RING finger protein 2; SH3 domain-containing RING finger protein 2; SH3R2_HUMAN; Sh3rf2.   

【規  格】：0.1ml/0.2ml

【相關標記】：Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.

【濃    度】：1mg/1ml

【抗體來源】：Rabbit or Mouse or Goat 

【克隆類型】：polyclonal or monoclonal

【產品類型】：一抗

【產品應用】：可以用于做石蠟切片免疫組化，冰凍切片免疫組化，Elisa，WB，免疫熒光、流式細胞術等實驗。

心臟蛋白磷酸酶1結合蛋白抗體背景介紹：The RING-type zinc finger motif is present in a number of viral and eukaryotic proteins and is made of a conserved cysteine-rich domain that is able to bind two zinc atoms. Proteins that contain this conserved domain are generally involved in the ubiquitination pathway of protein degradation. SH3RF2 (SH3 domain containing ring finger 2), also known as RNF158, is a 729 amino acid protein with one RING-type zinc finger domain and three SH3 domains. Via its RING-type zinc finger domain, SH3RF2 binds an E2 ubiquitin-conjugating enzyme. This suggests that SH3RF2 functions as an E3 ubiquitin-protein ligase that accepts a ubiquitin residue from an E2 ubiquitin-conjugating enzyme and immediay transfers that residue to a protein that is targeted for degradation. Due to alternative splicing events, SH3RF2 is expressed as two different isoforms.

有關免疫組化實驗的重要問題：

（一）組織材料處理

1.取材要取新鮮組織，大小合適，用生li鹽水洗凈

2.固定固定就是把病理標本組織浸泡在固定液中（常用的有4%多聚甲醛），使組織或細胞內蛋白質凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質，并保持細胞原有的形態結構

3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去，以利于進行脫水，若組織中留有較多的固定液，則將影響脫水劑，甚至可在組織中發生沉淀而影響后續染色及觀察，對于陳舊性標本或固定時間過長的標本，更應注意流水沖洗。

4.脫水脫水必須*，若脫水不盡，則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮，蠟塊切面出現凹陷現象，雖可勉強切片，但染色效果差，染色時也容易脫落

5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟，所以浸蠟之前需要一個既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑，以便使石蠟浸入到組織中去，當組織中全部被透明劑占有時，光線可以透過，組織可呈現不同程度的透明狀態，此現象稱為透明。如果組織不能透明，表明脫水未盡必須重新返工，否則影響到浸蠟的進行，但返工時往往效果不好

6.浸蠟浸蠟時間根據組織的類型可適當調整，一般原則較小組織脫水時間和浸蠟時間較短；骨、肌肉等堅硬組織脫水和浸蠟時間不宜過長；脂肪組織、疏松結締組織脫水和浸蠟時間需增加

7.包埋包埋時應注意組織的包埋方向，否則將影響組織切片的形態。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點*，包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應呈均勻的半透明狀，如出現白色渾濁則其中存在石蠟的結晶，這種蠟塊不能切除薄的切片。可能是組織脫水不充分，組織內或石蠟中混有透明劑，或包埋時動作太慢或石蠟凝固太慢所致，所以冷卻時水溫不能過高，否則就不宜迅速凝固

8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環境預冷，切出的切片連續性較好，有利于展片，一般切片厚度4-6um

心臟蛋白磷酸酶1結合蛋白抗體,Anti-RNF158抗體抗原修復，必須注意以下問題：
1、修復液的選擇。
0.01M枸櫞酸（pH6.0）：應用zui多的抗原修復液，適用于大多數的抗原，用該液修復后的抗原表達增強，抗原的定性和定位很理想，結果不錯;
0.05M EDTA（pH8.0）：應用較多的抗原修復液，修復能力較強，對于保存時間較長的切片或目的蛋白表達較弱的組織有很好的修復效果，需要控制好修復時間，否則容易出現較重的背景;
0.01M TBS（pH7.4）：中性修復液，適用于大多數抗原，對于核定位蛋白有較好的修復效果;
*：應用較多的抗原修復液，適用于大多數的抗原，使用溫度37℃，對于容易脫片的切片有很好的保護作用。
*：應用較多的抗原修復液，適用于大多數的抗原

2.抗原熱修復時應選擇的溫度。
據實驗認為溫度在92℃－98℃是合適的，尤其在95℃為，這是因為：（1）這種溫度未達沸騰，切片不容易脫離載玻片；（2）能夠解離和破壞與蛋白交聯的甲醛醛鍵等，處理時可以隨意選擇和確定抗原修復的作用時間。如果選擇高壓修復，因為溫度較高，時間不宜過長

3.抗原修復時有效溫度所需持續時間根據各單位的設備條件以及使用的儀器不同，抗原修復時在有效的溫度范圍內所持續的時間也不一樣。
4.抗原修復液必須遵循自然降溫規律，否則效果不好或達不到抗原修復的目的。
5.盡量使用足量的抗原修復液，防止切片干涸。
6.切片必須附貼牢固，否則發生掉片。

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