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江蘇菲亞生物科技有限公司
主營產品： 轉化生長因子 elisa試劑盒,植物葉酸 elisa試劑盒,豬藍耳(PRRS)elisa kit |
公司信息
人ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
2018-2-8 閱讀(1763)
人ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法：
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人ELISA試劑盒實驗原理：
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中依次加入標本或者標準品、生物素化的抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定OD值，計算樣品濃度。
實驗過程中需要用到的器材：
1.標準規格酶標儀；
2.高速離心機；
3.電熱恒溫培養箱；
4.干凈的試管和Eppendof管；
5.系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器；
6.蒸餾水，容量瓶等。
實驗操作注意事項：
1、試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7、底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
