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江蘇菲亞生物科技有限公司
主營產品： 轉化生長因子 elisa試劑盒,植物葉酸 elisa試劑盒,豬藍耳(PRRS)elisa kit |
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ELISA試劑盒檢測方法
2017-3-9 閱讀(805)
zui近，站上關于ELISA試劑盒的討論帖子非常多，今天也發表一下自己的一些看法，對ELISA的見解有不對的地方，希望指正或者直接拍磚。如何靈活應用ELISA這個檢測方法以及如何去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個方法的原理，大家都很清楚，網上的資料一大堆。可真正用起來的時候，有時候就有點犯糊涂，我談一下自己的理解。
ELISA試劑盒檢測方法簡述:
1)間接法測抗體：將特異性抗原包被在固相載體上，形成固相抗原，加入待檢標本（含相應抗體），其中抗體與固相抗原形成抗原-抗體復合物，再加入酶標記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗體，亦稱二抗），與上述抗原-抗體復合物結合。此時加入底物，復合物上的酶則催化底物而顯色。
雙抗體夾心法測抗原：將已知的特異性抗體包被在固相載體上，形成固相抗體，加入待檢標本(含相應抗原)，抗原與固相抗體結合成復合物，再加入特異性酶標抗體，使之與已形成的抗原-抗體復合物結合，當加入與酶相應的底物時，酶催化底而顯色，根據顏色的有無和顏色的深淺對待測抗原進行定性和定量。
ELISA試劑盒競爭法測抗原：將特異性抗體與固相聯結，形成固相抗體，加入待測標本（含相應抗原）和相應的一定量的酶標抗原，待測標本中的抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，待測標本中抗原含量越高，則與固相抗體結合亦越多，使得酶標抗原與固相抗體結合的機會就越少，甚至沒有機會結合。加入底物后不顯色或顯色很淺，顯色深者為陰性。
酶聯免疫試驗的量反應分析：不同的酶聯免疫方法檢測結果的OD值均與標本中待檢的抗原或抗體的量相關（間接法和夾心法正相關，競爭法負相關），因此可以利用OD值對標本中的待檢物質進行定量分析。
酶聯免疫試驗質反應分析：ELISA試劑盒根據檢測標本OD值，對標本中待測物質做出有或無的判定.
