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ELISA實驗標(biāo)本的采納和保留

閱讀:260發(fā)布時間:2017-9-5

ELISA實驗標(biāo)本的采納和保留

優(yōu)異的試劑,良好的儀器和的操作是確保ELISA檢查成果牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不一樣而有所區(qū)別,國內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗通常均用板式點。
這篇文章將敘說板式ELISA試劑盒各個操作過程的留意關(guān)鍵,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特別儀器合作使用,兩者均有詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵循規(guī)則操作,必能得出的成果。
可用作ELISA測定的標(biāo)本非常廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物)。大多數(shù)ELISA檢查均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清自然凝結(jié)、除特別情況外,在醫(yī)學(xué)查驗中均以血清作為檢查標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等使用。
血清標(biāo)本可按常規(guī)辦法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標(biāo)本也許會添加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時檢查。如有細(xì)菌污染,菌體中也許富含內(nèi)源性HRP,也會發(fā)作假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保留過久,其間的可發(fā)作聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。通常說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超越一星期測定的需低溫冰存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢查。重復(fù)凍融會使抗體效價下跌,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保留作多次檢查,宜少數(shù)分裝冰存。保留血清自收集時就應(yīng)留意無菌操作,也可參加恰當(dāng)防腐劑。

 


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