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如何正確選擇抗體?

閱讀:113發布時間:2017-8-4

如何正確選擇抗體?

公司一直致力于不斷傾聽、挖掘與滿足客戶的各種需求,孜孜不倦地追求產品和技術服務的突破與創新,立志成為上有影響力的、對生命科學研究和人類的健康有巨大推動作用的中國生物技術公司
慢性肉芽腫病(chronic granulomatous disease,CGD)是一種影響兒童感染康復生存幾率的遺傳性疾病。患者的吞噬細胞缺乏NADPH氧化酶活性,不能產生活性氧分子,尤其是超氧陰離子,致使細菌和真菌感染反復發生。然而,這種過激炎癥反應的確切機制仍不清楚。根據《Nature》雜志發表的一篇文章,意大利佩魯賈大學的研究人員通過研究,表明在患有致命肺部曲霉病的CGD小鼠中,犬尿氨酸代謝通路中色氨酸代謝的過氧化物依賴步驟被阻斷,導致Vγ1+γδ T細胞活性不受控制,大量產生IL-17,并伴隨急性炎性肺部損傷。研究人員發現有效的治療方法是在通路阻斷的另一側用天然的犬尿氨酸替換治療,并同時注射重組干擾素-γ,來恢復下游的免疫活性代謝物,并促進Vγ4+ γδ和Foxp3+ αβ 調節性T細胞的生成。

在本研究中的一個關鍵步驟,研究人員使用了R&D Systems的IL-17單克隆抗體(MAB421)在CGD小鼠體內中和IL-17后能有效提高CGD小鼠生存率,從而驗證IL-17在CGD小鼠感染模型中扮演的角色。別小看這個抗體,只有用天然或重組的完整蛋白免疫動物,才能地篩選出針對蛋白的活性區域結合的中和抗體----很多品牌都沒有這個抗體,就是因為沒有天然或重組的完整蛋白免疫動物。

如何正確選擇抗體?

抗體的種類繁多,各種來源和標記令人眼花繚亂,供應商也參差不齊。如何選擇合適的抗體確實是個令人頭痛的問題,不妨從下面幾個方面著手選擇:
1 特異性:抗體能否特異性地結合特定的抗原,自然是選擇正確抗體的關鍵。同時還需要關注抗體特異識別抗原的部位,交叉反應性和抗原抗體結合的親和力。特異性與抗體制備時使用的抗原和抗體純化工藝密切相關。

2 來源和標記:通常單克隆抗體來源于小鼠,多克隆抗體來源于兔和山羊;以生物素,各種酶和熒光素標記,可根據實驗需要來選擇。
3 應用:不同的抗體能應用于不同的實驗,如ELISA,IHC,FC,WB和體內功能性實驗等等,往往需要通過相應的實驗來驗證,實驗時根據樣本和目的不同來選擇。


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