培養基的滅菌并不復雜,只需要區分培養基中的哪些成分是可以高溫高壓,哪些不需要.此外還需要控制溫度.

    允許高溫高壓的成分在滅菌前配置好,高溫高壓滅菌即可（絕大多數成分可以直接高溫高壓滅菌）,部分成分高溫高壓后會導致其失效的應該在滅菌完成后加入,加入前可以用濾過除菌法滅菌.

    一般來說,糖發酵類和部分選擇性高的培養基是在115度溫度下滅菌,其他多數為121 度.選擇性非常強的培養基甚至只需要煮沸即可.

1.首先將內層滅菌筒取出，再向外層鍋加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。

2.放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。三角瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞，

3.加蓋，將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓。

4.通電加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。待冷空氣*排盡后，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升，當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。

5. 滅菌所需時間到后，切斷電源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由于內外壓力不平衡而沖出燒瓶或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生污染。