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ELISA問題總結:
1、在稀釋抗體中加入的蛋白穩定劑是什么?
技術分析:一般就先用一些無關蛋白,如果不行可以添加少量甘油,再不行的話則需購買專門的穩定劑了。
2、在試劑盒的研發中抗體是zui重要的嗎?
技術分析:原料zui重要,只要是原料無論抗體和抗原都很重要。
3、ELISA靈敏度是由抗體的特性決定的,那么有否可能通過優化各種條件使得成型的試劑盒的靈敏度得到較大的提高?
技術分析:檢測的靈敏度主要是由原料決定的,但可以通過調整濃度以及其它條件進行改善。
4、OPD比TMB靈敏,那么在顯色系統中為什么不用OPD呢?
技術分析:現在的國內商品試劑盒都使用TMB了,TMB實際上比OPD靈敏,相對來說OPD比較穩定。
ELISA試劑盒技術人員的心得體會:
1)用固定的幾把移液器,這樣可以盡可能的較少誤差!
2)用任何試劑前都要把試劑混勻,這是因為蛋白是很容易沉淀的,這一點需要您特別注意。
3)濕盒孵育前要先把濕盒放在37℃進行溫度平衡,這樣可以減少達到平衡的時間,也可以避免符合試驗溫度的孵育時間不夠。
4)等板底的水珠揮發以后再讀數,要不會出現負值的。
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