1.低聚木糖的測定(液相色譜法)

    本方法適用于添加低聚糖的食品中低聚塘的檢測.ELISA試劑盒

1. 1方法提要

    低聚糖各組分用液相色譜法分離井定量測定。以乙睛、水作流動相在碳水化合物分析柱上糖的分離順序是先單糖后雙糖，先低聚后多聚，以示差折射檢測器檢測。由T于本產(chǎn)品為>95%的低聚木塘純品，故可用面積比值法求出樣品中低聚搪含量。

1. 2儀器

(1)液相色譜儀:Waters HPLC 515泵，410示差折光射檢測器，色譜工作作站。

(2)超聲波振蕩器。

(3)微孔過灣器(濾膜0. 45um)

1. 3試劑

(1)乙腑(色譜純)

(2)水(三蒸水并經(jīng)Milli-Q超純處理)

(3)  D一木搪(D-xylose)C5H1005上海市化學(xué)試劑公司分裝(E. Merck分裝):定位用.。因Sigma公司無低聚木糖的樣品。ELISA試劑盒

1. 4測定步驟

(1)樣品處理

    用精度0. 0001g的分析大平準(zhǔn)確稱取膠囊內(nèi)容物約1.0g，于100ml的容器中.加水約80m1于超聲波振蕩器中振蕩提取15分鐘，加水至刻度，搖勻，用0.45um濾膜過濾后直接進(jìn)樣測定。

(2)色譜分離條件:

色譜柱:SUGAR PAK I 6.5MMX300MM COL，SUGAR-PAK INSERTS 10/PK，GUARD-PAK HOLDER

流動相:乙腈+水(85+15)

流速:0.8m1/min

檢側(cè)器靈敏度:4

進(jìn)樣zui:20uL

(3)樣品測定:

    取樣品處理液20uL注入液相色譜儀進(jìn)行分離。1%純木糖溶液作定位用。根據(jù)低聚糖的分離原理，木糖色譜峰后的所有峰為低聚木糖的總和。以其峰面積計算出樣液中低聚木糖的含量。

(4)低聚木糖的分離順序為:

    阿拉伯糖(Al)葡萄搪(G1)、木糖(X)、木二糖(X1)、木二糖(X2)、木四塘(X3)、木五糖

  (X4)、木六糖(X5)、木七糖(X6).ELISA試劑盒