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HO-8910PM細胞,人高轉移卵巢癌細胞培養方法

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更新時間:2017-11-03 10:36:18瀏覽次數:158次

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經營模式:生產廠家

商鋪產品:9950條

所在地區:上海上海市

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產品簡介

上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“HO-8910PM細胞,人高轉移卵巢癌細胞培養方法",進口來源,國內保種,活性保證,咨詢:.

詳細介紹

 

【友情提示】:產品價格與說明書請添加客服或來電詢價,索要說明書;

產品名稱:HO-8910PM細胞,人高轉移卵巢癌細胞培養方法

細胞特性

培養條件:RPMI-1640 +10% FBS
形態:貼壁;上皮細胞樣
背景:是來源于HO-8910的高轉移亞系。STR檢測發現SGC7901、SMMC7721、QGY7701、QGY7703、QSG7701、Ho-8910PM、Ho-8910、BEL7402、SMMC7721等多株細胞為同一遺傳背景,懷疑彼此間存在交叉污染。

含量:>1x10的6次方 個/mL
污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

基本特性:
描述:(1)所有細胞株購自ATCC;
(2) 公司可提供新鮮或凍存細胞株;
(3) 細胞株數量約 1000000個/瓶;
(4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

密度超過90%,并且細胞狀態很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代,提供復蘇好的細胞株,貼壁及懸浮細胞形式,細胞狀態良好,飽滿、光澤度好,*,并提供細胞報價、所需培養基、種屬來源、組織來源、形態、背景資料等。

細胞株培養的具體無菌技術要點:
1. 實驗開始前,無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%ethanol擦拭無菌操作臺面,并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后,才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株,即使培養基*相同也不可共用培養基,以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后,請將實驗物品拿出工作臺,用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后,才能進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時放置,其它實驗用品使用完畢后應移出,有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的*無菌區域內完成,請勿在邊緣非無菌區域進行操作。
3. 小心取用無菌實驗物品,避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后,請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應當首先注意自身安全,必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作,并選擇適當等級的無菌操作臺進行(至少是Class II)。操作過程中,應避免引起aerosol的產生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項目:
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無菌水,每周定時更換)。
5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預濾網(300小時/預濾網,3000小時/HEPA)。
6. 水槽內可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
 
細胞用途:僅供科研使用。
                       


HO-8910PM細胞,人高轉移卵巢癌細胞培養方法復蘇方法

1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。

2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。

3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養液,吹打使細胞懸浮。

4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養液漂洗、離心。

5.加入培養液適當稀釋后,再移裝入培養瓶中,置溫箱培養,次日更換一次培養液后再繼續培養。

 我公司認為購買細胞的客戶有培養細胞的經驗,客戶收到細胞,原瓶里的培養液可以收集繼續使用,在*次消化傳瓶時,我們要求客戶留一瓶細胞繼續使用我們的培養液,其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養液,這樣可減少由于細胞不適應培養液導致的細胞問題。
 

來源有保障(世界*品牌),狀態且傳代次數好,經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數>1000000個,具有高品質、高純度、高穩定性等特點,純化技術保證產品性能。
運輸方式:活細胞運輸(T-25 flasks)。
細胞純度:95%。
細胞來源:ATCC等。
包裝:內層無菌自封袋,防壓泡沫盒,外層防壓保溫氣泡袋,說明書。

用途:本產品只提供給進一步的科研使用,不可應用于治療等其他方面。

細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存.

 

,動物種別:人

組織來源:高轉移卵巢癌細胞

形態:

培養基和添加劑:RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。

REFERENCE:Chinese J. Pathology 27(6):451-452,1998 Chinese Journal of Cancer 22(4):358-362,2003

注意事項

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

本公司的細胞培養操作規程,供參考
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

傳代時間:2-3天 3-5天

傳代比例:1:2~1:3  1:1~1:2

細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

細胞實驗安全性:所有細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

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