CCC-HBE-2細(xì)胞供應(yīng)CCC-HBE-2細(xì)胞技術(shù)服務(wù)

為了您可以及時(shí)了解您所需要的細(xì)胞信息，建議直接細(xì)胞管理員，獲取培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)、價(jià)格、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)操作注意事項(xiàng)等問(wèn)題；

細(xì)胞培養(yǎng)傳代操作：【嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作】 

1、吸出原瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加胰酶（2-3ml0.25%）進(jìn)行消化；

注意：胰酶消化時(shí)把握時(shí)間，通常控制在1-2min；

2、鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)去掉胰酶，加4-6ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落、吹散；

3、取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿、瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

細(xì)胞包裝：

復(fù)蘇細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶×1常溫運(yùn)輸）

凍存細(xì)胞（凍存管、干冰包裝）

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部分細(xì)胞培養(yǎng)信息：（更多、更全的細(xì)胞信息 請(qǐng)資料細(xì)胞庫(kù)管理員）

BaF3細(xì)胞信息：    懸浮細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  IMDM    血清：    10% 胎牛血清 

BALB/3T3 clone A31細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  DMEM    血清：    10% 胎牛血清 

BCPAP細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  F-12K    血清：    10% 胎牛血清 

BEAS-2B細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  RPMI-1640    血清：    10% 胎牛血清 

BEL-7402細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  RPMI-1640    血清：    10% 胎牛血清 

BEND.3細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  DMEM高糖    血清：    10% 胎牛血清 

Beta-TC-6細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    80%  DMEM    血清：    20% 胎牛血清 

BeWo細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  F12K    血清：    10% 胎牛血清 

BGC-823細(xì)胞信息：    貼壁細(xì)胞    培養(yǎng)基：    90%  RPMI-1640    血清：    10% 胎牛血清 

細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)生產(chǎn)的質(zhì)量控制對(duì)細(xì)胞的生存是非常重要的，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中分子伴侶calnexin/calreticulin循環(huán)保證只有正確折疊的糖蛋白才能到達(dá)它們的目的地。

而錯(cuò)誤折疊的糖蛋白則通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)降解途徑(ERAD-ER-associated degradation)進(jìn)行降解。ERAD使蛋白質(zhì)被逆向定位到細(xì)胞質(zhì)中，再被蛋白酶解體進(jìn)行降解。

以前發(fā)現(xiàn)一個(gè)跨膜的缺失甘露糖苷酶活性的alpha類甘露糖苷酶I型蛋白-EDEM(a transmembrane-mannosidase-I-like protein that lacks mannosidase activity)能夠加速ERAD的活性。

通派生物 現(xiàn)貨供應(yīng)：    巨孢鏈霉菌    ATCC 43688

通派生物 現(xiàn)貨供應(yīng)：    棘孢小單胞菌    ATCC 15837

N鏈接多糖Glc1Man9GlcNAc2的糖蛋白能夠與calnexin或calreticulin進(jìn)行結(jié)合，由這兩個(gè)分子伴侶來(lái)促進(jìn)它們的折疊，如果加入葡萄糖則能夠干擾這個(gè)過(guò)程。

但當(dāng)折疊沒(méi)有*的時(shí)候，游離的糖蛋白或者由糖基轉(zhuǎn)移酶繼續(xù)糖基化然后由分子伴侶促進(jìn)折疊，或者被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的alpha甘露糖苷酶I作用產(chǎn)生Man8GlcNAc2而將糖蛋白導(dǎo)向ERAD的降解途徑。

通派生物 現(xiàn)貨供應(yīng)：    Amycolatopsis albidoflavus    ATCC53205

通派生物 現(xiàn)貨供應(yīng)：    林肯鏈霉菌    ATCC 25466

Nagata and colleagues在*篇文章中發(fā)現(xiàn)EDEM與跨膜的分子伴侶calnexin作用，而不與可溶性的分子伴侶calreticulin，而且calnexin的跨膜區(qū)對(duì)它們的相互作用是必需的。

研究者用ERAD途徑降解的底物之一NHK(an α1-antitrypsin variant)分析發(fā)現(xiàn)，EDEM和NHK與calnexin的結(jié)合和底物從calnexin上的釋放對(duì)于EDEM介導(dǎo)的ERAD途徑是必需的。而且EDEM可以通過(guò)促進(jìn)底物從calnexin的釋放來(lái)加速ERAD途徑。

通派生物 現(xiàn)貨供應(yīng)：    米黑根毛霉    ATCC 26282

通派生物 現(xiàn)貨供應(yīng)：    米根霉    ATCC 96382

發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)EDEM的水平不僅僅加速了膜結(jié)合的ERAD底物降解，也加速了可溶性的ERAD底物降解。而且當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的EDEM水平降低時(shí)ERAD底物降解被減慢了。

他們的工作對(duì)于EDEM在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白合成過(guò)程中的質(zhì)量控制機(jī)制有了初步的探討。