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293 Ad5細胞培養、說明書
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293 Ad5細胞培養、說明書 技術文章:
MicroRNAs是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成,不同于sirna(雙鏈)但是和siRNA密切相關。
這些非編碼小分子RNA(miRNAs)參與調控基因表達,但其機制區別于siRNA介導的mRNA降解。*個被確認的miRNA是在線蟲中發現的lin-4 和let-7,隨后多個研究小組在包括人類、果蠅、植物等多種生物物種中鑒別出數百個miRNAs。
MicroRNA對于植物的胚芽發育有重要的影響,這種影響主要是通過減少調節基因表達的蛋白的表達,而在脊椎動物中,microRNA的這一作用并不明顯。
但是研究小組發現的驚人結果揭示了在小鼠胚胎中miRNAs對心臟發育的意義。這一研究說明了miRNAs在心臟基因調控上、下游中的作用,也為理解器官在形成時的調控奠定了良好的基礎。
研究小組選定了兩個miRNA相關基因:miR-1-1 and miR-1-2,這兩個基因產物在心臟和肌肉組織中大量表達。
由于在胚胎結構中定位miRNAs十分困難,所以研究人員利用了一個可以產生藍點的報告基因來便于定位miRNAs。
他們將報告基因接到miR-1-1的前端,結果發現在胚胎期小鼠的心臟和肌肉中都發現有報告基因的表達,并且這種表達受到幾個心臟和肌肉關鍵轉錄因子(serum response factor (SRF), Mef2 和 MyoD)的調控。
這個結果表明miRNAs就像其它一般的基因一樣的受到調控,因此可能miRNAs也會對和其它基因一樣的“發育暗示”做出反應。
研究者的這一發現開啟了器官形成過程中調控的一個全新的研究視角,即通過miRNA調控器官發育形成。但是許多問題還未知,需要進一步進行研究。
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