組織/細胞基因組DNA快速提取試劑盒（離心柱型）
規格：50次 100次 200次
適用范圍：適用于快速提取各種動植物細胞/組織基因組DNA

保存周期：室溫儲存12個月

產品介紹：
*的結合液/蛋白酶K迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶，然后基因組DNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜， 再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟， 抑制物去除液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除， zui后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質膜上洗脫。
產品特點：
1. 離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。
2. 不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
3. 快速，簡捷，單個樣品操作一般可在30分鐘內完成。
4. 多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.7～1.9，長度可達30kb -50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各種酶切反應。

組織/細胞基因組DNA快速提取試劑盒（離心柱型）操作步驟：
提示：*次使用前請先在漂洗液WB中加入量無水乙醇，充分混勻，加入后請及時在方框打鉤標記已加入乙醇，以免多次加入!
1. 組織培養細胞
a. 收集約105-106懸浮細胞到一個1.5ml離心管；對于貼壁細胞，應該先用胰蛋白酶消化后吹打下來收集。
b. 13,000rpm離心10秒，使細胞沉淀下來。棄上清，留下細胞團和大約10-20μl殘留的液體。
c. 加200μl 1XPBS重懸洗滌細胞，13,000rpm離心10秒，使細胞沉淀下來。*吸棄上清, 將細胞沉淀重懸于180μl 1XPBS中。
d. 加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液，充分混勻，再加入200μl結合液CB，立刻渦旋振蕩充分混勻，在70℃放置10分鐘。
可選做步驟: 如果RNA殘留較多，需要去除RNA，可以在加入200μl 結合液CB 前加20μl RNase A(25mg/ml)溶液，振蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
e. 冷卻后加210μl無水乙醇或異丙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻，此時可能會出現絮狀沉淀。
f. 將上一步混合物（包括可能有的沉淀）加入一個吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm離心60秒，倒掉收集管中的廢液。
g. 接操作步驟項下4。
2. 動植物組織（例如鼠肝腦或者植物葉片）
a. 新鮮或者解凍的組織在液氮中研磨成細粉后或者用解剖刀切成小碎塊（切成微塊可以提高產量）后取20-50mg，轉入裝有180μl組織裂解液TL的1.5ml離心管中， 用大口徑槍頭吹打混勻。
b. 加入20μl的蛋白酶K溶液(20mg/ml)，立刻渦旋振蕩充分混勻。
c. 將裂解物放置在55℃水浴1-3小時或者直到組織消化*，期間輕柔的振蕩幾次幫助裂解。
可選做步驟: 如果RNA殘留較多，需要去除RNA，可在完成步驟c后加20μl RNase A(25mg/ml)溶液，振蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
d. 加入200μl 結合液CB，立刻渦旋振蕩充分混勻，70℃放置10分鐘。
e. 冷卻后加210μl無水乙醇或 異丙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻，此時可能會出現絮狀沉淀。
f. 用1ml的槍頭吸取混合物，將混合物加入一個吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm離心60秒，倒掉收集管中的廢液。
    如果有不溶組織物可能堵住槍頭，可將槍頭在吸水紙上輕蹭去除不溶物；如果吸上來的混合物少則可以將槍頭和不溶物一起棄去，該做法是為了去除不溶物，以免堵塞離心柱。
g. 接操作步驟項下4。
3. 動物組織（鼠尾）
a. 將0.2-0.5cm的鼠尾巴尖(即20-50mg)剪碎（一定要剪0-2cm范圍內的尾巴尖，否則裂解效果不好），或者在液氮中研磨組織成細粉后，轉入裝有180μl組織裂解液TL的1.5ml離心管中， 用大口徑槍頭吹打混勻。
b. 加入20μl的蛋白酶K(20mg/ml)，立刻渦旋振蕩充分混勻。
c. 將裂解物放置在55℃水浴3小時或者直到組織消化*，期間輕柔的振蕩幾次幫助裂解。
可選做步驟: 如果RNA殘留較多，需要去除RNA，可在完成步驟c后加20μl RNase A(25mg/ml)溶液，振蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
d. 用一個1ml不帶針頭的一次性輸液器抽打裂解物2-3次，如果固體物質較多，可12,000rpm離心60秒，取上清。
e. 加入200μl 結合液CB和210μl無水乙醇或 異丙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻。
f. 將上清加入一個吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）12,000rpm離心30-60秒，倒掉收集管中的廢液。
g. 接操作步驟項下4。
上述步驟中立刻渦旋或者吹打充分混勻非常重要，混勻不充分嚴重降低產量，必要時如樣品粘稠不易混勻時可以渦旋振蕩15秒混勻。
4. 加入500μl抑制物去除液IR，12,000rpm 離心30秒，棄廢液。
5. 加入500μl漂洗液WB（請先檢查是否已加入無水乙醇!），12,000rpm 離心30秒，棄掉廢液。
6. 加入500μl漂洗液WB，12,000rpm 離心30秒，棄掉廢液。
7. 將吸附柱AC放回空收集管中，13,000rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液， 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應。
8. 取出吸附柱AC，放入一個干凈的離心管中，在吸附膜的中間部位加100μl洗脫緩沖液EB （洗脫緩沖液事先在65-70℃水浴中預熱效果更好）， 室溫放置3-5分鐘，12,000rpm 離心1分鐘。將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，室溫放置2分鐘，12,000rpm離心1分鐘。
洗脫體積越大，洗脫效率越高，如果需要DNA濃度較高，可以適當減少洗脫體積， 但是zui小體積不應少于50μl，體積過小降低DNA洗脫效率，減少DNA產量。
9. DNA可以存放在2-8℃，如果要長時間存放，可以放置在－20℃。

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