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南京海克爾生物科技有限公司
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閱讀:1909發(fā)布時間:2017-11-2
南京森貝伽產(chǎn)品*,*,質(zhì)量保證,產(chǎn)品買的多折扣就多,另有禮品贈送。我司主營現(xiàn)貨產(chǎn)品有培養(yǎng)基、ELISA試劑盒、染色液、血清、細胞株、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品等,訂購!
本公司產(chǎn)品僅用于科研使用,不供臨床實驗。
以下細胞處理方法僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時或郵件
需要特別指出的是:如細胞出現(xiàn)問題,請于48h內(nèi)及時反饋,本公司將竭誠為您服務(wù)!
一.貼壁細胞
1. 客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 顯微鏡觀察細胞,當(dāng)細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
5. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%*-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細胞。
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)。
2. 嚴(yán)格無菌操作,用吸管吸出管中細胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。
4.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)
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