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標(biāo)準(zhǔn):菌落總數(shù)(cfu/cm2):≤30 大腸菌群:(MPN/100cm2)<3
1 采樣時(shí)間: 在消毒后,使用前進(jìn)行采樣。
2 采樣方法(濾紙浸貼法)
將5cm×5cm(25cm2)滅菌濾紙片使用前用無菌生理鹽水浸濕均勻,使用無菌鑷子夾住貼在食品接觸面表面(如模具、傳送帶、手等表面),充分接觸停留1分鐘,反轉(zhuǎn)背面同法操作停留1分鐘,立即投入盛有50mL的滅菌鹽水三角瓶中,充分振搖后,制成原液。
3 檢測方法:按GB4789.1-4789.3執(zhí)行
3.1菌落總數(shù)的檢測
用無菌吸管取1.0mL原液接種于滅菌平皿內(nèi),平行接種兩個(gè)平皿,加入滅菌冷卻至約46℃的營養(yǎng)瓊脂約15mL,邊傾注邊搖勻,待瓊脂凝固,反轉(zhuǎn)平皿置于37℃恒溫箱培養(yǎng)48小時(shí),計(jì)數(shù)菌落數(shù),用cfu/cm2表示。
菌落總數(shù)(cfu/cm2)=平板上菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)
3.2大腸菌群的檢測
3.2.1方法:用無菌吸管取3個(gè)10mL原液分別接種于3個(gè)含10mL雙倍乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管內(nèi)(管內(nèi)均裝有3.5cm長的小倒管);用無菌吸管取3個(gè)1mL原液,分別接種在3個(gè)含10mL單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管內(nèi);將原液1:10稀釋后,取3個(gè)1mL,分別接種在3支含10mL單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管內(nèi)。共9支發(fā)酵培養(yǎng)管,置于37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時(shí)。若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管均不產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,則可報(bào)告大腸菌群陰性。若乳糖膽鹽發(fā)酵管變黃且產(chǎn)氣,要進(jìn)行分離培養(yǎng)。取一接種環(huán)劃種伊紅美藍(lán)瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24小時(shí),挑取典型菌落,涂片進(jìn)行革蘭氏染色。同時(shí)接種乳糖復(fù)發(fā)酵管,置37℃培養(yǎng)24小時(shí),觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖復(fù)發(fā)酵管產(chǎn)氣、革蘭染色為陰性的無芽孢桿菌,即可報(bào)告為大腸菌群陽性。
3.2.2結(jié)果報(bào)告:根據(jù)大腸菌群陽性管數(shù),查大腸菌群zui可能數(shù)(MPN)檢索表,降低十倍報(bào)告,用MPN/100cm2表示(見GB4789.3-2003)。
4注意事項(xiàng)
4.1若污染不嚴(yán)重,大腸菌群檢驗(yàn)可僅做三管原液檢驗(yàn),報(bào)告大腸菌群的MPN值即可。
4.2若測定菌落總數(shù)接種于平皿內(nèi)的是原液,因稀釋倍數(shù)為1,則直接報(bào)告菌落總數(shù)的平均值。
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