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兔子乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒使用步驟

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使用目的:

本試劑盒用于測定兔子血清、血漿及相關液體樣本中乙醛脫氫酶(ALDH)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔子乙醛脫氫酶(ALDH)水平。用純化的兔子乙醛脫氫酶(ALDH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乙醛脫氫酶(ALDH),再與HRP 標記的乙醛脫氫酶(ALDH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙醛脫氫酶(ALDH)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中兔子乙醛脫氫酶(ALDH)濃度。

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

24ng/ml 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

12ng/ml 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

6.0ng/ml 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

3.0ng/ml 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

1.5ng/ml 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

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