介紹

在基礎(chǔ)研究和工業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)的支原體污染是一個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題，感染了87%的細(xì)胞系。與細(xì)菌和真菌污染不同，細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)下的支原體污染很難通過(guò)視覺(jué)和嗅覺(jué)來(lái)了解。正常情況下，支原體存在于培養(yǎng)細(xì)胞中，水平為 1 x 10e6 ~ 1 x 10e8 cfu/ml，但不能用倒置顯微鏡觀察。支原體感染會(huì)改變真核細(xì)胞的生長(zhǎng)和形狀，影響細(xì)胞功能，因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異很大。因此，定期使用支原體檢測(cè)試劑盒檢查支原體的存在非常重要。

PlasmoTest™ - 基于細(xì)胞的色彩反應(yīng)性產(chǎn)品

[原理]

PlasmoTest™ 是一種基于細(xì)胞的比色測(cè)定法，它利用 Toll 樣受體 2 （TLR2） 識(shí)別支原體的能力。如果培養(yǎng)基中存在支原體，則 HEK-Blue-2™ 細(xì)胞表面的 TLR2 被激活，從而激活 NF-κB 和 AP-1。這些轉(zhuǎn)錄因子最終誘導(dǎo) SEAP（分泌的胚胎堿性磷酸酶）的分泌，導(dǎo)致含有 HEKBlue™ 檢測(cè)的培養(yǎng)基出現(xiàn)紫色/藍(lán)色變化。因此，支原體感染的存在可以用肉眼或OD 620-655nm確定。

[特征]

-靈敏度：在培養(yǎng)物中檢測(cè)高達(dá)5*10^2 ~5*10^5 cfu/ml-特異性：檢測(cè)各種可能被污染的粘原體-快速：處理時(shí)間小于1小時(shí)，O/N孵育后可確認(rèn)
結(jié)果-簡(jiǎn)單 ：細(xì)胞培養(yǎng)上清液可以通過(guò)
變色進(jìn)行檢查-可靠：無(wú)假陽(yáng)性

[商品包括]

• PlasmoTest™ comprises the HEK-Blue™-2 cells (3-7x 10e6 cells)

• HEK-Blue™ Selection (250X, 2 ml)

• HEK-Blue™ Detection (1ea/50 ml)

• HEK-Blue™ water (60 ml)

• Normocin™ (500X, 1 ml)

• Positive control & negative control (1 tube each)

[如何使用PlasmoTest™]

1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清液收集500μl用于支原體測(cè)試

2. 100°C，熱處理15分鐘

3. 通過(guò)將 HEK-Blue 檢測(cè)溶解在 50 ml HEK-Blue™™ 水中（使用前過(guò)濾）制備

4. 將熱處理的樣品以50μl的增量轉(zhuǎn)移到96孔板中

5. 所包含的對(duì)照品也以50μl的增量轉(zhuǎn)移到96孔板中

6. 在預(yù)熱的 HEK-Blue™ 檢測(cè)培養(yǎng)基中制備 HEK-Blue-2™ 細(xì)胞懸液（剩余的 HEK-Blue-2™ 細(xì)胞在細(xì)胞儲(chǔ)存后最多可使用 30 次傳代）

7. 每孔加入 200 μl（~50,000 個(gè)細(xì)胞）細(xì)胞懸液

8. 在37°C的CO 2培養(yǎng)箱中過(guò)夜（16-24小時(shí)）

9. 支原體的存在可以用肉眼確認(rèn)，也可以通過(guò)OD 620-655nm的顯色來(lái)確認(rèn)

[表格 1.] 敏感性

訂購(gòu)信息

**購(gòu)買(mǎi)單個(gè) PlasmoTest™ 后，您可以購(gòu)買(mǎi)補(bǔ)充試劑盒，即[rep-ptrk] PlasmoTest™ Reagent Kit.