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產地 | 國產 | 規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 |
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組織來源 | 骨髓 | 貨號 | CS-X3176 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 |
產品信息:
貨號 | CS-X3176 | 組織來源 | 骨髓 |
傳代特性 | 可傳1-2代;不建議多次傳代 | 培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產品名稱:人骨髓來源內皮祖細胞 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人骨髓來源內皮祖細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構,其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的人骨髓來源內皮祖細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的人骨髓來源內皮祖細胞經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 內皮細胞樣 傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品:
人外周血單核細胞 | 人瓜氨suan檢測試劑盒 |
小鼠大隱靜脈內皮細胞 | 人α肌動蛋白(αActin)檢測試劑盒 |
小鼠肺微血管內皮細胞 | 人肥大細胞類胰凝乳蛋白mei試劑盒ELISA |
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小鼠骨髓單核細胞 | 鳩寧病毒RT-PCR試劑盒 |
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞 | 車前子染料法PCR鑒定試劑盒 |
小鼠肌源性干細胞 | 消化道病毒多重PCR檢測試劑盒 |
小鼠結腸平滑肌細胞 | 寨卡病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠卵泡膜細胞 | 流產布魯氏菌PCR試劑盒 |
小鼠腦微血管內皮細胞 | 犬RT-PCR試劑盒 |
小鼠皮層神經元細胞 | 犬艾利希體(犬埃立克體)PCR試劑盒 |
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小鼠腎皮質上皮細胞 | 禽腺病毒C種型(FADV-C-)核suan檢測試劑盒 |
小鼠食管上皮細胞 | 幽門螺旋桿菌PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
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