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技術(shù)文章

微生物鑒定方法

閱讀:133發(fā)布時間:2011-6-27

目前常見的微生物鑒定原理有以下幾種:
 
1. 酸堿反應(yīng):細(xì)菌代謝碳水化合物,一般產(chǎn)生酸性物質(zhì);分解蛋白質(zhì)或氨基酸,則產(chǎn)生堿性物質(zhì),根據(jù)不同細(xì)菌的理化性質(zhì)不同,測定細(xì)菌的分解底物導(dǎo)致PH值變化而產(chǎn)生的不同顏色,來判斷菌種。
 
2. 酶譜分析:根據(jù)細(xì)菌生長產(chǎn)生酶的特性,在測定底物中加入基質(zhì)。使其與細(xì)菌生長過程中的酶結(jié)合成熒光物質(zhì),可以在較短的時間判定菌種。
 
3. 高壓液相色譜分析:用氣相色譜檢測細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的代謝產(chǎn)物(揮發(fā)和非揮發(fā)脂肪酸),結(jié)果與數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)比較后,得出鑒定結(jié)果。
 
4. 代謝指紋法:其原理是根據(jù)細(xì)菌對碳源(或氮源)利用的差異來區(qū)別和鑒定細(xì)菌,不同的細(xì)菌會利用不同碳源(或氮源)進(jìn)入新陳代謝過程(稱為呼吸),而對其他一些碳源(或氮源)則無法利用,將每種細(xì)菌能利用和不能利用的一系列碳源(或氮源)進(jìn)行排列組合,就構(gòu)成了該種細(xì)菌特定的代謝指紋,由于細(xì)菌在利用碳源進(jìn)行呼吸時,會發(fā)生一系列的氧化-還原反應(yīng),產(chǎn)生電子,TTC(四唑紫,2,3,5-TriphenylTetrazoliumChloride)在呼收電子后,會由無色的氧化型轉(zhuǎn)變?yōu)樽仙倪€原型,通過肉眼觀察或計算機控制的讀數(shù)儀,將反應(yīng)結(jié)果同數(shù)據(jù)庫中的指紋進(jìn)行比對,從而得到細(xì)菌的鑒定結(jié)果。
 

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