人十二脂腸腺癌

HuTu-80

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相關(guān)知識>>>>

　　實驗步驟
　　1．人無菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒雙手。
　　2．倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。
　　3．超凈臺臺面應(yīng)整潔，用0.1％新潔爾滅溶液擦凈。
　　4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關(guān)閉超凈臺的紫外燈，打開抽風(fēng)機(jī)清潔空氣，除去臭氧。
　　5．點燃酒精燈；取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮頭；過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)。
　　6．將培養(yǎng)用液瓶口用75％酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
　　7．倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下。
　　8．每個大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶，小瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中。
　　9．加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基（7～10mL／大瓶，3～5mL／小瓶）制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋，適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn)，以利于CO2氣體的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
　　10．對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟7-9不做。可將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
除病毒外的所有生物，都由細(xì)胞構(gòu)成。自然界中既有單細(xì)胞生物，也有多細(xì)胞生物。細(xì)胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。細(xì)胞是生物界中，*一部分。
　　細(xì)胞是生命的基本單位，細(xì)胞的特殊性決定了個體的特殊性，因此，對細(xì)胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。細(xì)胞生物學(xué)已經(jīng)成為當(dāng)代生物科學(xué)中發(fā)展zui快的一門*學(xué)科，是生物、農(nóng)學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關(guān)專業(yè)的一門必修課程。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎大都授予了從事細(xì)胞生物學(xué)研究的科學(xué)家。
除病毒外的所有生物，都由細(xì)胞構(gòu)成。自然界中既有單細(xì)胞生物，也有多細(xì)胞生物。細(xì)胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。細(xì)胞是生物界中，*一部分。
　　細(xì)胞是生命的基本單位，細(xì)胞的特殊性決定了個體的特殊性，因此，對細(xì)胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。細(xì)胞生物學(xué)已經(jīng)成為當(dāng)代生物科學(xué)中發(fā)展zui快的一門*學(xué)科，是生物、農(nóng)學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關(guān)專業(yè)的一門必修課程。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎大都授予了從事細(xì)胞生物學(xué)研究的科學(xué)家。
傳代方法：
1．懸浮生長細(xì)胞傳代
離心法傳代：離心（1000轉(zhuǎn)/分）去上清，沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。v2．半懸浮生長細(xì)胞傳代（Hela細(xì)胞）
此類細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象，但貼壁不牢，可用直接吹打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來，進(jìn)行傳代。
3．貼壁生長細(xì)胞傳代
采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。
細(xì)胞膜（Cell Membrane）:
　　細(xì)胞壁的內(nèi)側(cè)緊貼著一層極薄的膜，叫做細(xì)胞膜。這層由蛋白質(zhì)分子和磷脂雙層分子組成的薄膜，水和氧氣等小分子物質(zhì)能夠自由通過，而某些離子和大分子物質(zhì)則不能自由通過，因此，它除了起著保護(hù)細(xì)胞內(nèi)部的作用以外，還具有控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的作用：既不讓有用物質(zhì)任意地滲出細(xì)胞，也不讓有害物質(zhì)輕易地進(jìn)入細(xì)胞。