主要試劑
柱材Oliga(dT）－纖維素
上樣液：20mM Tris-HCL(pH 7.6)
0.5M NaCL
1mM EDTA (pH 8.0)
0.1% 十二烷基肌氨酸鈉（SLS）
洗脫液：10mM Tris-HCL(pH 7.6)
1mM EDTA (pH 8.0)
0.05% SDS
主要設備
層析系統，水浴，離心機，取液器，分光光度計
實驗步驟
1. DEPC處理層析柱。
2. 0.1M NaOH處理Oliga(dT）－纖維素。
3. 用1×上樣液洗柱至pH< 8.0。
4. 無菌水溶解RNA，65℃溫浴5分鐘后，迅速冷卻至室溫，加等體積2×上樣液，上樣，分部收集。
5. 1倍體積1×上樣液洗柱，分部收集。
6. OD260沉淀收集液，確定收集液的該值是否接近0，如該值仍很大，則上樣液繼續洗柱，直至該值接近0。
7. 2－3倍柱床體積的洗脫液，洗柱，分部收集。
8. 測定各收集管的OD260，將有吸光值的各管合并。
9. 在洗脫液中加入0.1體積的NaAC，1體積的異丙醇，－20℃沉淀過夜，12000g 離心10min，75%乙醇洗沉淀，真空干燥。
10. 提取mRNA質量的分光光度計檢測，將所提mRAN分別在260，280nm比色，要求A：OD260％/ OD280％不小于2.0及40μg所提樣品在OD260％的值為1 .
11. 提取mRNA質量的電泳檢測，在1%的變性膠上，EB染色后，mRNA應在0.5-8Kb間均勻著色，1.5-2Kb間著色較強。
