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抑制素檢測原理介紹

時間:2011/6/7閱讀:293
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抑制素是轉化生長因子-β超家族成員,分A、B兩型,由α亞基分別與βA或βB亞基組成,性腺是其主要來源,能抑制等促卵泡激素垂體后葉激素合成與分泌,調控紅系前體細胞增殖。

 

抑制素是一種由女性卵巢顆粒細胞及男性睪丸支持細胞分泌的異二聚體蛋白質激素。它選擇性抑制卵泡刺激素(FSH)的分泌,對性腺也有局部旁分泌作用。完整的抑制素分子是一個分子量約為32KD的分子,由兩個不同的亞單位(a亞單位和b亞單位)經(jīng)二硫鍵連接而成。卵泡液和血清中也可以發(fā)現(xiàn)a亞單位。此外,游離的a亞單位與b亞單位沒有生物活性。

 

抑制素的二聚體抑制素BELISA使用一對高度特異的抗體,僅與有功能的抑制素B分子特異性結合,不檢測體液中的游離a亞單位。抑制素B由a亞單位和bB亞單位組成。抑制素B的主要作用是通過對FSH的負反饋作用調節(jié)配子發(fā)育。幾種已發(fā)表的報告均表明,抑制素B可作為一種內分泌標記物,通過對它的檢測,可以監(jiān)測男性或女性的性腺功能。

 

抑制素的檢測原理:

DSL-10-84100ACTIVE®InhibinBELISA試劑盒使用酶增強“雙位點”“兩步”雙抗體夾心免疫測定法。在實驗中,標準品、質控及待測血清樣本都在包被有抗抑制素bB亞單位抗體的微孔板中孵育。孵育及洗板之后,所有孔都加入*標記的抗抑制素a亞單位的檢測抗體。再孵育及洗板之后,所有孔加入鏈霉和素-辣根過氧化物酶結合物。第三次孵育及洗板之后,加入TMB底物孵育。之后加入終止液,zui后用雙波長、在450nm及620nm處測吸光度。測得的吸光度與抑制素B的濃度成正比。標準品用于描繪吸光度的標準曲線,待測抑制素B的濃度可從此曲線中讀出。

 

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