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大鼠D二聚體(D2D)ELISA試劑盒,大鼠elisa試劑盒詳細分解
原理,大鼠elisa試劑盒原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠D二聚體水平。用純化的其抗體包被微孔板,制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入大鼠D二聚體,再與HRP標記的其抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠D二聚體的濃度。
組成,大鼠elisa試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(160pg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
大鼠elisa試劑盒試劑的準備及樣品的收集
1、試劑的準備孔板(條或孔)和陽性和陰性質控臨用前取出,應在室溫下放置至少半小時。不使用的微孔板應置于2-8°C保存,剩余的陽性和陰性質控應放回原處冰凍保存。
2、切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍吧保存?zhèn)溆茫瑯吮救诨笕匀话杀3?-8℃的溫度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器講標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
大鼠elisa試劑盒注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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