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上海華壹生物科技有限公司
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人TAU蛋白(TAU)elisa試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
HE045
人TAU蛋白(TAU)elisa試劑盒
Human TAU ELISA Kit
實驗原理 :
本試劑盒用于測定人血清,細胞上清及相關液體樣本中 TAU 蛋白(TAU)的含量。應用雙抗體夾心法測定標本中人 TAU 蛋白(TAU)水平。用純化的人 TAU 蛋白(TAU)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入 TAU 蛋白(TAU),再與 HRP 標記的 TAU 蛋白(TAU)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 TAU 蛋白(TAU)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人 TAU 蛋白(TAU)濃度。
人TAU蛋白(TAU)elisa試劑盒組成:
試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置 保存
說明書 1 份 1 份
封板膜 2 片(48) 2 片(96)
密封袋 1 個 1 個
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品:270ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶標試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液 (20ml×20 倍)×1 瓶 (20ml×30 倍)×1 瓶 2-8℃保存
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值為 0.92 以上。
2.批內與批間應分別小于 9%和 15%
檢測范圍:
7ng/L -220ng/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6 個月
操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標
準品 100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液 50μl,混勻;然后從*孔、第二
孔中各取 100μl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50μl,
混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 棄掉,再各取 50μl 分別加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各
取 50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl,混
勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液 50μl,混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50μl,
濃度分別為 180ng/L,120ng/L ,60ng/L,30ng/L,15ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣
品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混
勻。
3. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
4. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
5. 配液:將 30(48T 的 20 倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30(48T 的 20 倍)倍稀釋后備用。
6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5 次,拍干。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯
色 10 分鐘.
8. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
9. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
試劑盒供應商:上海華壹生物科技有限公司
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