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人尿微量白蛋白（mALB）ELISA Kit

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人尿微量白蛋白（mALB）ELISA Kit
Human microalbunminuria（mALB）ELISA Kit
檢測(cè)范圍：
10μg/L -220μg/L
試劑盒保存：2-8℃。
有效期：6 個(gè)月

詳細(xì)介紹

人尿微量白蛋白(mALB)ELISA Kit
Human microalbunminuria(mALB)ELISA Kit
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒用于測(cè)定人尿液相關(guān)液體樣本尿微量白蛋白(mALB）含量。應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人尿微量蛋白(mALB)水平。用純化的人尿微量蛋白(mALB)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入尿微量蛋白(mALB)，再與 HRP 標(biāo)記的 mALB 抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的尿微量蛋白(mALB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人尿微量蛋白(mALB)濃度。
人尿微量白蛋白(mALB)ELISA Kit操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)
準(zhǔn)品 100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻；然后從*孔、第二
孔中各取 100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，
混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 棄掉，再各取 50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各
2
取 50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混
勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)
品稀釋液 50μl，混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為 50μl，
濃度分別為 180μg/L，120μg/L ，60μg/L，30μg/L，15μg/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣
品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl（樣
品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混
勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30（48T 的 20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30（48T 的 20 倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注：人尿微量白蛋白(mALB)ELISA Kit僅供科學(xué)研究使用，內(nèi)容供參考，具體產(chǎn)品信息請(qǐng)?jiān)诰€或。
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