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上海華壹生物科技有限公司
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閱讀:5001發布時間:2011-9-23
免疫組織化學染色-SP法
1、脫蠟、水化; 2、PBS洗2~3次各5分鐘; 3、3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室溫靜置10分鐘; 4、PBS洗2~3次各5分鐘; 5、抗原修復; 6、PBS洗2~3次各5分鐘; 7、滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。 8、滴加Ⅰ抗50μl,室溫靜置1小時或者4℃過夜或者37℃1小時。 9、4℃過夜后需在37℃復溫45分鐘。 10、PBS洗3次各5分鐘; 11、滴加Ⅱ抗40~50μl,室溫靜置,或37℃1小時; 12、II抗中可加入0.05%的tween-20。 13、PBS洗3次各5分鐘; 14、DAB顯色5~10分鐘,在顯微鏡下掌握染色程度; 15、PBS或自來水沖洗10分鐘; 16、蘇木精復染2分鐘,鹽酸酒精分化; 17、自來水沖洗10~15分鐘; 18、脫水、透明、封片、鏡檢。
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