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022090氨基酸脫羧酶試驗基礎培養基(DecarborxylaseMediumBase)用途:氨基酸脫羧酶試驗基礎培養基供鑒別腸道菌屬能否產生氨基酸脫羧酶用(GB/T4789.4-2008和《中華人民共和國藥典》2005年版)
022090 氨基酸脫羧酶試驗基礎培養基
(Decarborxylase Medium Base)
用 途:
氨基酸脫羧酶試驗基礎培養基供鑒別腸道菌屬能否產生氨基酸脫羧酶用(GB/T4789.4-2008和《中華人民共和國藥典》2005年版)。
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵糖類;溴甲酚紫為pH指示劑,酸性呈黃色,堿性呈紫色;在基礎培養基加入賴氨酸、和檢測細菌是否產生以上底物的酶。
培養基配方(每升):
蛋白胨 5g
酵母膏粉 3g
葡萄糖 1g
溴甲酚紫 0.016g
最終pH 6.8±0.2
使用方法:
1、稱取氨基酸脫羧酶試驗基礎培養基9g,加入蒸餾水或去離子水或去離子水1 L,分別加入5g L-氨基酸或10g DL-氨基酸(賴氨酸、或),攪拌加熱煮沸至*溶解后再校正pH。對照培養基不加氨基酸。分裝試管,每管2.5mL,液面復蓋約3mm高度液體石蠟。
2、115℃高壓滅菌10min,待冷卻后備用。
3、取待檢菌的新鮮純培養物,分別接種在含有各種氨基酸的培養基內(仔細地通過培養基內的液體石臘層接種在培養基內)和不含氨基酸的對照管內,置36±1℃培養18—24h后作初次觀察,必要時可延長至48h。
4、氨基酸脫羧酶陽性者由于產堿,培養基呈紫色。陰性者無堿性產物,但因葡萄糖產酸而使培養基變為黃色。對照管應為黃色。
質量控制:
下列菌株接種后36±1℃培養18—24h,結果如下:
注意事項:
1、接種前須將各種培養基及對照管做好標記,以免混淆,造成錯誤判斷。
2、經培養后對照管必須為黃色,否則氨基酸脫羧酶試驗無效。
3、判斷結果時,應與未接種的培養基進行比較,試驗管出現任何紫色的痕跡都可判定為陽性結果,培養時間一般不應超過4d,若時間過長,蛋白胨中其他氨基酸可被分解產堿,出現假陽性。
4、有時培養時間過長指示劑被破壞,顏色可能不清楚或消失,可在試管內再加溴甲酚紫來證實。
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規 格:100g
參考文獻:
1. GB/T4789.4-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物檢驗 沙門氏菌檢驗
2.《中華人民共和國藥典》2005年版,附錄XI J 微生物限度檢查。
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