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血清學試驗2011/12/23
血清學試驗血清學反應是指：相應的抗原與抗體在體外一定條件下作用，可出現肉眼可見的沉淀、凝集現象。在食品微生物檢驗中，常用血清學反應來鑒定分離到的細菌，以zui終確認檢測結果。血清學反應的一般特點：1）...
甲醛測定的測定方法2011/12/21
甲醛測定的測定方法主要有分光光度法、色譜法、電化學法、化學滴定法等，此處僅就其中的一些主要方法介紹如下：1.分光光度法分光光度法測定的主要方法有乙酰丙酮法、鉻變酸法、MBTH法、付品紅法、ＡＨＭＴ法等...
流式細胞術2011/12/19
流式細胞術（FlowCytometry，FCM）是一種對單細胞或其他生物粒子膜表面以及內部的化學成分進行定量分析和分選的檢測手段，它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數，同傳統的熒...
ELISPOT培養板的選用2011/12/16
ELISPOT板的主要生產商如：U-CyTech,Millipore,Nunc,BD,Whatman等。目前生產的ELISPOT板包括透明，不透明（白色），PVDF膜等多種類型的板。國外主要生產商所生...
布氏桿菌病酶聯免疫吸附試驗2011/12/14
（1）間接ELISA（1ELISA）我國現已建立了間接ELISA方法，但目前應用還較少。間接ELISA試驗中，多是以光滑型脂多糖（sLPS）作為抗原的，這些方法大多已通過田間試驗并得到了驗證，并正在被...
腫瘤標志物酶聯免疫測定的標準化2011/12/12
腫瘤標志物較多，下面主要談一談AFP，PSA和CEA測定的標準化問題。AFP由于其具有相對的肝臟特異性，在臨床上主要用于原發性肝癌的輔助診斷，此外還可用于妊娠中3個月胚胎21三體型（Down綜合征）的...
ELISA（EIA）酶結合物的制備2011/12/9
免疫酶技術（immunoenzymatictechnique）又稱酶免疫測定法（enzymeimmunoassay,EIA）,是繼免疫熒光技術和放射免疫技術之后發展起來的又一種免疫標記技術。它是把抗原...
酶標記抗體法染色的基本原理2011/12/7
酶標記抗體法和熒光素標記抗體法的原理類似，分為直接法和間接法，其原理基本相同，但敏感性不同。（一）直接法直接法是將酶（如HRP）標記在特異性抗體（*抗體）上，然后用酶標記抗體直接與相應原特異性結合，形...
化學發光酶免疫測定2011/12/5
化學發光免疫測定（chemiluminesentimmunoassay，CLIA）是免疫測定技術繼酶免技術（EIA）、放免技術（RIA）、熒光免疫技術（FIA）和時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）之后...
ELISA法檢測干擾素2011/12/3
干擾素（IFN）是一類具有廣譜抗病毒活性的蛋白質，僅在同種細胞上發揮作用。根據其來源、理化及生物學性質的不同，可分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ3種干擾素。其中，IFN-α主要由白細胞產生，IF...
反義RNA技術改良2011/12/1
用反義RNA分子來調節基因表達時，經常會遇到的困難是反應模板的穩定性差。因此，人們正在探索如何改進反義基因的新方法，目前主要有：（1）優化反義RNA的結合。反義RNA鏈的長度對抑制基因的效果是重要的。...
酶標記熒光信號放大技術在IHC中的應用2011/11/29
目前IHC方法可用許多的方法進行檢測，如ABC法、S-P法、CSA法、EnVision法等。可用于標記的酶有HRP、AKP和葡萄糖氧化酶等。zui后可通過酶促反應使其在抗原抗體結合部位轉化為一定顏色的...
改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體2011/11/25
HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基，再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯，在標記前先用2，4-二硝基氟苯（DNFB）封閉酶蛋白中殘留的a-和e-...
ELISA顯色和比色的方法2011/11/24
（1）顯色顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫...
ELISA中常見問題及解決方法2011/11/22
ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法...
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