国产精自产拍久久久久久蜜,亚洲视频在线观看,亚洲小说图片,国产伦精品一区二区三区免.费

上海通蔚生物科技有限公司
中級會員 | 第16年

15800441009

操作細胞系步驟以及小技巧,常用的方法?

時間:2021/6/21閱讀:1996
分享:

脂質體作為體內和體外輸送載體的工具,已經研究的十分廣泛,中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。帶正電的陽離子脂質體,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞。?

 一、細胞系方法原理
細胞系方法主要包括:電穿孔法、磷酸鈣沉淀法、脂質體轉染法、病毒介導的轉染等,理想的細胞轉染方法是具有高轉染效率、對細胞的毒性作用小等,本文主要介紹細胞轉染常用的方法-脂質體轉染的原理和操作步驟等。?

優點: 與其它方法相比,有較高的效率和較好的重復性,它適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中,是目前條件下蕞方便的轉染方法之一。

二、細胞系操作步驟

(1) 細胞系培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃ CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。

(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)

A液:用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。

B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。

分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。

(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養液繼續培養。

(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。

我司成立的初衷就定位于以人為本,以細胞系產品品質取勝的理念,為我們國家生命科學研究做一些力所能及的工作,做一家值得尊重并受人信賴的企業!產品免費運輸,如出現運輸質量問題,我們可以包退換貨,具有完善的庫存及供應體系以及高效穩定的純化技術,保證產品均能現貨供應和產品質量的穩定性。?

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 江城| 广宁县| 亳州市| 乾安县| 淮阳县| 堆龙德庆县| 大连市| 吉林省| 博野县| 潍坊市| 东乡族自治县| 永安市| 固安县| 来安县| 江北区| 高州市| 诸暨市| 思茅市| 长沙市| 吕梁市| 白银市| 稻城县| 丰镇市| 宜昌市| 临安市| 集安市| 龙里县| 肥城市| 田阳县| 宁明县| 肥西县| 榆树市| 巧家县| 封开县| 印江| 珠海市| 东城区| 靖宇县| 密云县| 察雅县| 郧西县|