聯(lián)系電話
上海勁馬實驗設備有限公司
中級會員·17年
- 聯(lián)系人：
- 馮經(jīng)理
- 電話：
- 021-60521817
- 手機：
- 13817140470
- 售后：
- 86-021-61107441
- 傳真：
- 86－021－64881400
- 地址：
- 上海市松江區(qū)漕河涇研展路455號B座
- 個性化：
- www.shjmsw.com
- 手機站：
- m.shjmsw.com
- 網(wǎng)址：
- www.shjmsw.com
掃一掃訪問手機商鋪
檢測范圍
1pg/ml-80pg/ml
使用目的
本試劑盒用于測定樣本表皮生長因子(EGF)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人表皮生長因子(EGF)水平。用純化的人表皮生長因子(EGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子(EGF)，再與HRP標記的表皮生長因子(EGF)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子(EGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人表皮生長因子(EGF)濃度。
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
64pg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
32pg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
16pg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
8pg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
4pg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
完整版說明書可咨詢我司業(yè)務員。上海勁馬生物科技有限公司是國內ELISA試劑盒優(yōu)質供應商，代理銷售不同ELISA試劑盒品牌的進口/國產ELISA試劑盒，專業(yè)供應科研實驗所需的培養(yǎng)基，抗體，動物血清血漿，標準品對照品，化學試劑，酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，微生物，蛋白質，ELISA種屬涵蓋廣，憑借多年行業(yè)經(jīng)驗，完善的售后服務，高質量的產品。如果您有實驗上的問題歡迎來咨詢。
