聯(lián)系電話
上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司
中級(jí)會(huì)員·17年
- 聯(lián)系人：
- 馮經(jīng)理
- 電話：
- 021-60521817
- 手機(jī)：
- 13817140470
- 售后：
- 86-021-61107441
- 傳真：
- 86－021－64881400
- 地址：
- 上海市松江區(qū)漕河涇研展路455號(hào)B座
- 個(gè)性化：
- www.shjmsw.com
- 手機(jī)站：
- m.shjmsw.com
- 網(wǎng)址：
- www.shjmsw.com
掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
血清是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要元素之一，在實(shí)驗(yàn)室操作中要注意及處理的方法：
1.血清的保存
血清應(yīng)保存在-5℃~-2O℃。若存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若無(wú)法一次用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
2.解凍血清的方法
將血清從冷凍箱取出后，先置于2~8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。(融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻)
3如何處理血清解凍后的絮狀沉淀物
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，也是造成沉淀物的主要原因之一，但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
想要去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。(不建議以過(guò)濾的方法去除絮狀沉淀物，因?yàn)榭赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜)
4.為什么要熱滅活血清
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)，激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。
5.做熱滅活有必要嗎
實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，大多數(shù)的細(xì)胞不需要。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完-全沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懷遒|(zhì)量，造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成顯著增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。(若非必要無(wú)需做此步驟，不但節(jié)省時(shí)間，也確保血清的質(zhì)量)
6.為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)沉淀
胎牛血清沒(méi)有預(yù)老化，儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁，不會(huì)影響血清的質(zhì)量。(推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清，避免反復(fù)凍融)
7.避免沉淀物的產(chǎn)生
?、俳鈨鲅鍟r(shí)，按照所建議的步驟逐步解凍(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
?、诮鈨鲅鍟r(shí)，請(qǐng)隨時(shí)搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
③請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
?、苎宓臒釡缁罘浅Ｈ菀自斐沙恋砦锏脑龆?，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。
?、萑舯仨氉鲅宓臒釡缁?，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。⑥溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增加。
針對(duì)以上技術(shù)資訊內(nèi)容，如果您有不太清楚或者了解更多信息(包括基本信息/技術(shù)資料/解決方案)，都可以隨時(shí)聯(lián)系我司業(yè)務(wù)員。我司提供的ELISA試劑盒種屬齊全，質(zhì)量有保障！提供全程技術(shù)指導(dǎo)及免費(fèi)代檢測(cè)服務(wù)。
