人腦動脈血管內皮細胞培養試劑盒細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
接下來，細胞在新的培養環境中繼續生長，需要密切關注其狀態。每天定時觀察細胞形態、密度以及培養基的顏色變化，確保無細菌或霉菌污染。若培養基因細胞代謝而變黃，應及時更換新鮮培養基，以維持良好的生長環境。
在細胞培養過程中，溫度、濕度及CO?濃度的控制至關重要。通常，哺乳動物細胞培養在37℃、5% CO?及飽和濕度的條件下進行，這樣的條件能夠模擬體內環境，促進細胞增殖。定期檢查培養箱的性能參數，確保它們處于最佳狀態，是細胞培養成功的關鍵。
此外，細胞的健康狀態還需通過細胞活力檢測來評估。常用的方法包括臺盼藍染色法，通過染色區分活細胞與死細胞，從而計算出細胞活力百分比。保持高細胞活力對于后續實驗，如細胞轉染、細胞分化研究或藥物篩選等，都是至關重要的。
當細胞生長至適宜密度時，根據實驗需求，可進行凍存保藏或進一步實驗處理。細胞凍存時，需先配置含有適當比例血清和DMSO的凍存液，將細胞懸液與凍存液混合后，置于程序降溫盒中，逐步降溫至-80℃超低溫冰箱，最終轉移至液氮罐中長期保存。這一過程確保了細胞的長期存活和實驗的可重復性。
綜上所述，細胞處理是一個精細且需要耐心的工作，從復蘇到傳代再到后續的維護，每一步都需嚴格遵循操作規程，以確保細胞的健康生長和實驗的成功進行。
