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上海極威生物科技有限公司
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保質(zhì)期:六個(gè)月
品牌:國(guó)內(nèi)外ELISA試劑盒品牌
運(yùn)輸:包郵(中國(guó)大陸)
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒包裝形式:盒裝(液體盒裝)
ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟的一般常見方法
方法一)用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1)包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒,英文名: Canine hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit
國(guó)內(nèi)統(tǒng)一規(guī)格:48T/96T
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品牌:國(guó)內(nèi)外ELISA試劑盒品牌
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犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒包裝形式:盒裝(液體盒裝)
ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟的一般常見方法
方法一)用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1)包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2)加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3)加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4)加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5)終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6)結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二)用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
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