在ELISA試劑盒應用中有替代前者的趨勢。由于ABS-ELISA較普通ELISA多用了兩種，增加了操作步驟，在臨床檢驗中ABS-ELISA應用不多。 其原因可能是兩個順序采用高陽性預測值，因為這兩種檢測方法的樣品反應有較高的概率是真實的。而不是那些只在一個反應里。ELISA試劑盒即使WHO準則中提到，如果驗證性測試不可用，可以使用一個備用的測定，這是作為主要的測定，用于確認樣品的狀態。
    可得出結論：ELISA試劑盒單一的ELISA試劑盒反應的樣品有很高的概率是由負NAT或RIBA顯示。樣本是由兩個不同的ELISA檢測抗-HCV體現，ELISA試劑盒其他概率是由NAT或RIBA多次反應數據的證實。
    獻血者抗-HCV酶聯免疫吸附反應，ELISA試劑盒但負面的NAT和RIBA不一定是*遞延。他們可能會重新接納這些捐助者作出了巨大的貢獻，作為它允許定期寶貴的動機捐助者，其血液中已被證明是安全的。收件人的血液制品從以前的抗-HCV ELISA呈陽性，ELISA試劑盒基因- PCR呈陰性，RIBA不確定的或負的捐助者的捐獻，沒有丙型肝炎病毒感染。過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象，此時反應后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同（參見1.3.2，圖1-4），如按常法測讀，所得結果將低于實際的含量，這種現象被稱為鉤狀效應（hook effect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。

    鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時，應注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單抗體制備此類可削弱鉤狀效應。假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性，這也是用單抗作夾心法應注意的問題。雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結合。

    用作的血清標本中如含有RF，它可充當抗原成份，同時與固相抗體和酶標抗體結合，表現出假陽性反應。采用F（ab'）或Fab片段作酶結合物的，由于去除了Fc段，從而消除RF的干擾。ELISA試劑盒雙抗體夾心法ELISA是否受RF的影響，已被列為這類的一項考核指標。雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。