產(chǎn)品名稱：小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）?Elisa試劑盒
樣本： 血清、血漿及相關(guān)液體樣本
標(biāo)記物： 免費(fèi)代測(cè)
應(yīng)用： 酶聯(lián)免疫分析
檢測(cè)方法： 雙抗夾心法
檢測(cè)限： 見說(shuō)明書
供應(yīng)商： 上海彩佑實(shí)業(yè)有限公司
數(shù)量： 現(xiàn)貨
規(guī)格： 96T/48T
【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】：
1. ELISA試劑盒及待測(cè)樣本
2. 酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)
3. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
5. 吸水紙
【標(biāo)本要求】：
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3. 尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6. 組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
【操作步驟】：
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
【小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）?Elisa試劑盒】
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
【注意事項(xiàng)】：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
【操作事項(xiàng)】：
1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間（包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品）控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用多道移液器加樣。
3. 孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4. 洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5. 試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請(qǐng)配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置（如吸取檢測(cè)溶液A時(shí)，一次不要小于10μl），以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化（比如，每隔10分鐘），如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7. 底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
【洗板方法】：
1. 手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
2. 自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
【特別說(shuō)明】：
*: [96T/48T]（打開包裝后請(qǐng)及時(shí)檢查所有物品是否齊全完整）
#: 一周內(nèi)使用可存于4℃，需長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃，有效期6個(gè)月.
【小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）?Elisa試劑盒】：
1、、靈敏、特異的抗；
2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
5、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說(shuō)你的回收率是99%，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系，說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定，樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L，取100mL被測(cè)水樣品，加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品，測(cè)定時(shí)忽略體積變化，如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L，則認(rèn)為回收率為99%。
【小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）?Elisa試劑盒】1．適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
2．可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等
3．可檢測(cè)指標(biāo)齊全：白介素，干擾素，血管緊張素，肺炎衣原體，趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標(biāo)
【免費(fèi)代測(cè)服務(wù)】：
1.每個(gè)指標(biāo)需提供100微升樣品，如做復(fù)孔則200微升
2.標(biāo)本離心處理后可通知我們工作人員上門取樣（本市），外省可通過(guò)泡沫箱加干冰或者冰袋寄送我司。
小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）?Elisa試劑盒，其他相關(guān)產(chǎn)品介紹如下
大鼠催乳素(PRL)Elisa試劑盒 rat prolactin,PRL ELISA Kit
大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GRH)Elisa試劑盒 rat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)Elisa試劑盒 rat adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit
大鼠促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒 rat follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
大鼠雌二醇受體(ER)Elisa試劑盒 rat Estradiol receptor,ER ELISA Kit
大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)Elisa試劑盒 Rat Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit
大鼠大內(nèi)皮素(BigET)Elisa試劑盒 Rat Big Endothelin,Big ET ELISA Kit
大鼠大內(nèi)皮素(BigET)Elisa試劑盒 Rat Big Endothelin,Big ET ELISA Kit
大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)Elisa試劑盒 Rat very late appearing antigen,VLA ELISA Kit
大鼠降鈣素(CT)Elisa試劑盒 Rat Calcitonin,CT ELISA Kit
大鼠骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)Elisa試劑盒 Rat Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)Elisa試劑盒 Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit
大鼠促甲狀腺素(TSH)Elisa試劑盒 Rat Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit
大鼠*(Cortisol)Elisa試劑盒 Rat Cortisol ELISA Kit
大鼠雌二醇(E2)Elisa試劑盒 Rat Estradiol,E2 ELISA Kit
大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)Elisa試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit
大鼠睪酮(T)Elisa試劑盒 Rat Testoterone,T ELISA Kit
大鼠游離睪酮(F-TESTO)Elisa試劑盒 Rat Free Testoterone,F-TESTO ELISA Kit
大鼠雄烯二酮(ASD)Elisa試劑盒 Rat Androstenedione,ASD ELISA Kit
大鼠雌三醇(E3)Elisa試劑盒 Rat Estriol,E3 ELISA Kit
大鼠17羥孕酮(17-OHP)Elisa試劑盒 Rat 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit
大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)Elisa試劑盒 Rat Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit
大鼠甲狀腺素(T4)Elisa試劑盒 Rat thyroxine,T4 ELISA Kit
大鼠游離甲狀腺素(FT4)Elisa試劑盒 Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit
大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)Elisa試劑盒 Rat Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)Elisa試劑盒 Rat Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit
大鼠胰島素(INS)Elisa試劑盒 Rat Insulin,INS ELISA Kit
大鼠C肽(C-Peptide)Elisa試劑盒 Rat C-Peptide ELISA Kit
會(huì)員1.png)